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          PRODUCTS CENTER

          產(chǎn)品中心

          當(dāng)前位置:首頁產(chǎn)品中心科研細(xì)胞細(xì)胞系IM-9 (外周血B淋巴細(xì)胞)
          IM-9 (外周血B淋巴細(xì)胞)

          產(chǎn)品簡介

          IM-9 (外周血B淋巴細(xì)胞)的相關(guān)*:細(xì)胞APC蛋白表達(dá)比色法定量檢測試劑盒 10/50 次
          細(xì)胞APC蛋白表達(dá)熒光定量檢測試劑盒 10/50 次
          APC蛋白表達(dá)西方雜交分析試劑盒 5次
          APC蛋白免疫共沉淀分析試劑盒 5次
          APC蛋白表達(dá)ELISA定量檢測試劑盒 25次
          細(xì)胞CDK2蛋白表達(dá)流式細(xì)胞儀檢測試劑盒 10/20次

          產(chǎn)品廠地:上海市
          更新時間:2025-02-28
          廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
          訪問量:969
          詳細(xì)介紹在線留言
          品牌其他品牌貨號GOY-01X0365
          規(guī)格1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶供貨周期現(xiàn)貨
          主要用途產(chǎn)品僅供科研使用應(yīng)用領(lǐng)域化工

          冷凍保存細(xì)胞之方法?

          冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

          冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

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          產(chǎn)品屬性:   

          產(chǎn)品名稱

          規(guī)格

          貨號

          IM-9 (外周血B淋巴細(xì)胞)

          1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

          GOY-01X0365

          商品介紹:

          名稱    IM-9 (外周血B淋巴細(xì)胞)   

          別稱IM 9; IM9; GM04680

          組織來源外周血,B淋巴細(xì)胞

          生長特性懸浮細(xì)胞

          細(xì)胞形態(tài)淋巴母細(xì)胞樣

          生物安全等級2 [Cells contain Herpesvirus]

          生長培養(yǎng)基RPMI-164010% FBS1% P/S

          推薦傳代比例1:2-1:4

          推薦換液頻率2~3/

          倍增時間~45 hours

          凍存條件

          凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

          溫度:液氮

          培養(yǎng)條件

          氣相:空氣,95%CO25%

          溫度:37℃

          受體表達(dá)情況growth hormone receptor; insulin receptor; calcitonin receptor

          抗原表達(dá)情況CD11a+; CD19+; CD20+; CD38 -; CD49e+

          基因表達(dá)情況immunoglobulin

           

          實驗要點及說明:

          1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;

          2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;

          3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

          4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;

          5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

          實驗報告:

          一、分離與培養(yǎng):

          1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;

          2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

          3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

          4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

          5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

          二、免疫熒光鑒定:

          1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

          2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

          3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

          4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

          5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

          6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

           NOS1AP 基因全長ORF克隆

           KLC3 基因全長ORF克隆

           RFTN2 基因全長ORF克隆

           FNDC7 基因全長ORF克隆

           PRPF31 基因全長ORF克隆

           CYP2A7 基因全長ORF克隆

           ATG14 基因全長ORF克隆

           FGB 基因全長ORF克隆

           ALDH8A1 基因全長ORF克隆

           GABRR1 基因全長ORF克隆

          IM-9 (外周血B淋巴細(xì)胞)2 ug pRevTR pRevTR 低溫運輸,-20℃保存

          變形桿菌成套生化鑒定管(BXWS) BXWS 13種*1套/盒*10盒

          2 ug pcDNA3.1(+)/RFP pcDNA3.1(+)/RFP 低溫運輸,-20℃保存

          100次 植物種屬鑒定PCR Mix 4(質(zhì)體 matK) Plant DNA Barcoding PCR Mix -20℃保存

          100g 麥芽浸膏 Malt Extract 室溫陰涼干燥保存

          50T 難辨梭狀芽胞桿菌PCR檢測試劑盒   低溫運輸,-20℃保存

          5mL 滋養(yǎng)層細(xì)胞生長因子 Growth Factor For Cell Culture -20℃保存

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