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          PRODUCTS CENTER

          產(chǎn)品中心

          當(dāng)前位置:首頁產(chǎn)品中心科研細(xì)胞細(xì)胞系MDCK NBL-2 (犬腎細(xì)胞)
          MDCK NBL-2 (犬腎細(xì)胞)

          產(chǎn)品簡介

          MDCK [NBL-2] (犬腎細(xì)胞)的相關(guān)*:27548-93-2卡亭III 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
          79185-75-47-羥基馬兜鈴A 規(guī)格: 10mg
          巖大戟內(nèi)酯B;南大戟內(nèi)酯B 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
          18085-97-7棕矢 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
          規(guī)格: 1000u /瓶
          ()慶大-小諾 標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格: 100mg
          69884-00-0

          產(chǎn)品廠地:上海市
          更新時(shí)間:2025-02-28
          廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
          訪問量:681
          詳細(xì)介紹在線留言
          品牌其他品牌貨號GOY-01X0153
          規(guī)格1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶供貨周期現(xiàn)貨
          主要用途產(chǎn)品僅供科研使用應(yīng)用領(lǐng)域化工

          冷凍保存細(xì)胞之方法?

          冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

          冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí), 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

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          產(chǎn)品屬性:   

          產(chǎn)品名稱

          規(guī)格

          貨號

          MDCK [NBL-2] (犬腎細(xì)胞)

          1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

          GOY-01X0153

          商品介紹:

          名稱    MDCK [NBL-2] (犬腎細(xì)胞)   

          別稱MDCK (NBL-2); NBL-2; Madin-Darby Canine Kidney; Madin Darby Canine Kidney

          種屬家犬

          年齡(性別)雌性,成年

          組織來源腎

          生長特性貼壁細(xì)胞

          細(xì)胞形態(tài)上皮細(xì)胞樣

          背景描述MDCK(NBL-2)細(xì)胞是由S·H·MadinN·B·Darby19589月從一只外觀正常的成年雌性英國小獵犬的腎分離得到的;MDCK(NBL-2)細(xì)胞角蛋白免疫過氧化物酶染色呈陽性;MDCK(NBL-2)細(xì)胞被用于研究β-粥樣蛋白前體的處理及其蛋白水解產(chǎn)物。

          生物安全等級1

          生長培養(yǎng)基MEMATCC改良)10% FBS1% P/S

          推薦傳代比例1:2-1:4

          推薦換液頻率2~3/

          凍存條件

          凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

          溫度:液氮

          培養(yǎng)條件

          氣相:空氣,95%CO25%

          溫度:37℃

          基因表達(dá)情況The cells are positive for keratin by immunoperoxidase staining.

           

          實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:

          1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;

          2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;

          3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;

          4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;

          5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

          實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

          一、分離與培養(yǎng):

          1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;

          2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

          3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

          4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

          5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

          二、免疫熒光鑒定:

          1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

          2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

          3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

          4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

          5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

          6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

          牛甘肽S轉(zhuǎn)移A1(GSTA1)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

          丁型肝炎病毒(HDV)抗原免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

          羥甲基戊二酸單酰輔A還原(HMG-CoAR)免疫試劑盒*直銷

          腺病毒IgG(ADV-IgG)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

          倉鼠組織蛋白K(cath-K)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

          綿羊甘油醛-3-脫氫(GAPDH)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

          抗呼吸道合胞病毒抗體(RSV IgM)免疫試劑盒*直銷

          細(xì)胞角蛋白21-1片段(CYFRA21-1)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

          幽門螺旋桿菌IgM(Hp-IgM)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

          小鼠可溶性肌球蛋白重鏈2(sMHC-2)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

          MDCK [NBL-2] (犬腎細(xì)胞)100mL Glycylglycine Buffer,0.5M,pH8.5   Glycylglycine Buffer,0.5M,pH8.5   常溫保存

          AK瓊脂(2號) AK Agar(No.2) 250g

          1瓶 QG-56細(xì)胞株 QG-56 低溫運(yùn)輸和保存

          PS瓊脂 PS Agar 250g

          1g 膠原蛋白Ⅰ型 Collagen TypeⅠ 4℃保存

          50T 登革熱病毒Ⅱ型PCR檢測試劑盒  低溫運(yùn)輸,-20℃保存

          50次 微量蛋白沉淀試劑盒 Mini Protein Precipitation Kit 常溫保存

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