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          產品中心

          當前位置:首頁產品中心科研細胞細胞系P3/NSI/1-Ag4-1 NS-1 (小鼠骨髓瘤細胞)
          P3/NSI/1-Ag4-1 NS-1 (小鼠骨髓瘤細胞)

          產品簡介

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          細胞CASPAS

          產品廠地:上海市
          更新時間:2025-02-25
          廠商性質:經銷商
          訪問量:324
          詳細介紹在線留言
          品牌其他品牌貨號GOY-01X0407
          規格1×10?cells/T25培養瓶供貨周期現貨
          主要用途產品僅供科研使用應用領域化工

          產品屬性: 

          產品名稱

          規格

          貨號

          P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1] (小鼠骨髓瘤細胞)

          1×10?cells/T25培養瓶

          GOY-01X0407

          商品介紹:

          名稱    P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1] (小鼠骨髓瘤細胞) 

          別稱P3/NSI/1-AG4-1; P3/NS1/1-Ag4-1; P3/NS1/1-AG4-1; P3/NS1/Ag4-1; P3 NS1 Ag4/1; P3 NS1 Ag4; P3.NS-1/1.Ag4.1; P3-NS1/1-Ag4-1; P3-NS1/1Ag 4.1; P3/NS-1; NS1/1-Ag4.1; NS1-1 Ag4.1; NS-1-Ag4-1; NS1-Ag4/1; NS1-Ag 4/1; NS1-Ag4; P3X63NS1; NS-I/1; NS-1; NS1; GM03573; GM-3573

          種屬小鼠

          年齡(性別)不詳

          組織來源B淋巴細胞;漿細胞;骨髓瘤

          生長特性懸浮細胞

          細胞形態淋巴母細胞樣

          背景描述P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1]P3X63Ag8細胞的一個不分泌克隆。Kappa鏈合成了但不分泌,能抗0.1mM 8-氮雜鳥嘌呤,但不能在HAT培養基中生長。據報道,P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1]細胞是缺失了3-酮類固醇還原酶活性的膽固醇營養缺陷型細胞。

          生物安全等級1

          生長培養基DMEM10% FBS1% P/S

          推薦傳代比例3×10^5-5×10^5cells/mL

          推薦換液頻率2~3/

          倍增時間~24小時

          凍存條件

          凍存液:55% 基礎培養基+40%FBS+5%DMSO

          溫度:液氮

          培養條件

          氣相:空氣,95%CO25%

          溫度:37℃

          抗原表達情況H-2d

          基因表達情況immunoglobulin (not secreted), H-2d

          注意事項該細胞為懸浮細胞,請注意離心收集細胞懸液;請勿直接倒掉細胞培養液。

          冷凍保存細胞之方法?

          冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

          冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

          QQ截圖20210907103850.png

          實驗要點及說明:

          1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;

          2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;

          3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

          4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;

          5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

          實驗報告:

          一、分離與培養:

          1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;

          2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

          3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

          4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

          5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

          二、免疫熒光鑒定:

          1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

          2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

          3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

          4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

          5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

          6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

           LACRT 基因全長ORF克隆

           LY6D 基因全長ORF克隆

           PVALB 基因全長ORF克隆

           DCD 基因全長ORF克隆

           TP53AIP1 基因全長ORF克隆

           HIST1H4A 基因全長ORF克隆

           GAST 基因全長ORF克隆

           DEFA6 基因全長ORF克隆

           DEFB127 基因全長ORF克隆

           FAR2 基因全長ORF克隆

          P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1] (小鼠骨髓瘤細胞)100µL 小鼠抗mCherry標簽單抗 Anti mCherry-Tag Mouse MAb -20℃保存

          2 ug PT/neo PT/neo 低溫運輸,-20℃保存

          100mL RNase-free Tris HCl,1M,pH 7.5  常溫

          2 ug pDC315 pDC315 低溫運輸,-20℃保存

          液體硫乙醇酸鹽培養基 Thiolglycollate Medium 250g

          25g 水楊酸 Salicylic Acid 室溫避光保存

          50T 豌豆內源基因PCR檢測試劑盒  低溫運輸,-20℃保存

           

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