DT40 (雞淋巴瘤細(xì)胞)

產(chǎn)品簡介
DT40 (雞淋巴瘤細(xì)胞)的相關(guān)*：兩步法RT－PCR試劑盒 20/50次
一步法RT－PCR試劑盒 20/50次
直接細(xì)胞克隆兩步法逆轉(zhuǎn)錄PCR試劑盒 100次
兩步法RT－PCR熒光定量試劑盒 20/50次
逆轉(zhuǎn)錄RT試劑盒 20/50次
體外RNA轉(zhuǎn)錄合成試劑盒 10次

產(chǎn)品廠地：上海市

更新時(shí)間：2025-02-17

廠商性質(zhì)：經(jīng)銷商

訪問量：403

產(chǎn)品咨詢 15026555973

產(chǎn)品分類

技術(shù)文章

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品牌	其他品牌	貨號(hào)	GOY-01X0543
規(guī)格	1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶	供貨周期	現(xiàn)貨
主要用途	產(chǎn)品僅供科研使用	應(yīng)用領(lǐng)域	化工

產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品名稱	規(guī)格	貨號(hào)
DT40 (雞淋巴瘤細(xì)胞)	1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶	GOY-01X0543

商品介紹：

名稱 DT40 (雞淋巴瘤細(xì)胞)

別稱DT-40; DT 40; DT40B; LSCC-DT40

年齡（性別）1日齡

組織來源法氏囊，淋巴瘤

生長特性懸浮細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài)淋巴母細(xì)胞樣

背景描述DT40細(xì)胞是Hyline SC雞法氏囊淋巴細(xì)胞株經(jīng)鳥類白血病病毒誘導(dǎo)建株的細(xì)胞系。原始淋巴瘤用羅氏相關(guān)病毒1(RAV-1)感染出生1天的小雞得到，法氏囊中生成的腫瘤制成細(xì)胞懸液后通過靜脈注射輸入同基因型的受體小雞。經(jīng)過一次體內(nèi)移植后，建立了DT40細(xì)胞。DT40細(xì)胞包含的前病毒基因整合在c-myc原癌基因的上游，表達(dá)的c-myc RNA水平較高。DT40細(xì)胞缺少一個(gè)正常c-myc基因，但含有兩個(gè)拷貝ALV去調(diào)控的myc基因。DT40細(xì)胞保留了重排免疫球蛋白輕鏈基因(IgL)的能力。在IgL位點(diǎn)，DT40包含一個(gè)重排和一個(gè)胚系同源基因。c-rel基因和v-rel癌基因在DT40細(xì)胞中都能誘導(dǎo)組織相容性(MHC)Ⅱ類抗原表達(dá)。v-rel誘導(dǎo)的MHCⅡ表達(dá)比c-rel誘導(dǎo)快，且其有效性在數(shù)周后達(dá)到c-rel的50倍。DT40細(xì)胞呈淋巴母細(xì)胞表型；傳染性檢測(cè)表明，DT40細(xì)胞釋放低水平的傳染性RAV-1，DT40細(xì)胞株可以用于穩(wěn)轉(zhuǎn)研究。

生物安全等級(jí)1

生長培養(yǎng)基DMEM＋0.05mM β-mercaptoethanol＋10% Tryptose Phosphate Broth＋5% Chicken Serum＋10% FBS＋1% P/S

推薦傳代比例1:3-1:4

推薦換液頻率2~3次/周

倍增時(shí)間~48 hours

凍存條件

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

冷凍保存細(xì)胞之方法？

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲(chǔ)存。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下，再放入液氮槽vapor phase長期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí)，以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

QQ截圖20210907103850.png

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；

2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；

3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；

4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；

5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大?。?/span>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

B3GNT6 基因全長ORF克隆

AQPEP 基因全長ORF克隆

CLOCK 基因全長ORF克隆

FBXO11 基因全長ORF克隆

PLBD2 基因全長ORF克隆

MATN4 基因全長ORF克隆

ZIC3 基因全長ORF克隆

GLP1R 基因全長ORF克隆

IRF8 基因全長ORF克隆

CCNI2 基因全長ORF克隆

DT40 (雞淋巴瘤細(xì)胞)2 ug pRFP-GFP-LC3 pRFP-GFP-LC3 低溫運(yùn)輸，-20℃保存

變形桿菌成套生化鑒定管（SN） 13種/盒*10

2 ug pPinPoint-Xa1 pPinPoint-Xa1 低溫運(yùn)輸，-20℃保存

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100g 麥芽糖 D-(+)-Maltose Monohydrate 室溫保存

50T 腦膜炎奈瑟菌ACR檢測(cè)試劑盒低溫運(yùn)輸，-20℃保存

10 mg 5（6）-TRITC Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存

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