elisa酶聯(lián)免疫試劑盒說明書進(jìn)行初步效價(jià)的滴定

elisa酶聯(lián)免疫試劑盒說明書酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇：首先用直接ELISA試劑盒法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定（見酶標(biāo)記抗體部份）。然后再固定其它條件或采取“方陣法”（包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度）在正式實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。
酶的底物及供氫體的選擇：對(duì)供氫體的選擇要求是價(jià)廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng)，而本身無色。有些供氫體（如OPD等）有潛在的致癌作用，應(yīng)注意防護(hù)。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體，如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時(shí)間后，應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時(shí)間，以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制，尤其是H2O2在臨用前加入。
實(shí)驗(yàn)固相載體的選擇：許多物質(zhì)可作為固相載體，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體，在使用前均可進(jìn)行篩選：用等量抗原包被，在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng)，觀察其顯色反應(yīng)是否均一性，據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
包被抗體（或抗原）的選擇：將抗體（或抗原）吸附在固相載體表面時(shí)，elisa酶聯(lián)免疫試劑盒說明書要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0～9.6之間。吸附溫度，時(shí)間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃ 18～24小時(shí)。蛋白質(zhì)包被的zui適濃度需進(jìn)行滴定：即用不同的蛋白質(zhì)濃度（0.1、1.0和10μg/ml等）進(jìn)行包被后，在其它試驗(yàn)條件相同時(shí)，觀察陽(yáng)性標(biāo)本的OD值。選擇OD值z(mì)ui大而蛋白量zui少的濃度。對(duì)于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1～10μg/ml。
350mg    Paroxetine Hydrochloride     110429-35-1     鹽酸帕羅西汀標(biāo)準(zhǔn)品
350mg    Orbifloxacin    113617-63-3     奧比沙星標(biāo)準(zhǔn)品
350mg    Mirtazapine     85650-52-8     米氮平標(biāo)準(zhǔn)品
350mg    Mezlocillin Sodium     42057-22-7     美洛西林鈉標(biāo)準(zhǔn)品
350mg    Methysergide Maleate    129-49-7     馬來酸美西麥角標(biāo)準(zhǔn)品
350mg    Mazindol CIV    22232-71-9     馬吲哚標(biāo)準(zhǔn)品
350mg    Lopinavir    192725-17-0     洛匹那韋標(biāo)準(zhǔn)品
350mg    Levofloxacin     138199-71-0     左氧氟沙星標(biāo)準(zhǔn)品
350mg    Fluvastatin Sodium     93957-55-2     氟伐他汀鈉標(biāo)準(zhǔn)品
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