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          PRODUCTS CENTER

          產(chǎn)品中心

          當(dāng)前位置:首頁產(chǎn)品中心生化檢測(cè)試劑盒微量法錳過氧化物酶(MnP)測(cè)試盒微量法
          錳過氧化物酶(MnP)測(cè)試盒微量法

          產(chǎn)品簡(jiǎn)介

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          產(chǎn)品廠地:上海市
          更新時(shí)間:2025-03-04
          廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
          訪問量:664
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          品牌其他品牌貨號(hào)GOY-SH254
          規(guī)格100管/96樣供貨周期現(xiàn)貨
          主要用途僅供科研研究實(shí)驗(yàn)應(yīng)用領(lǐng)域生物產(chǎn)業(yè)
          檢測(cè)方法微量法產(chǎn)品類別其它系列
          品牌谷研貨期現(xiàn)貨

          正式測(cè)定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定

          商品屬性:

          產(chǎn)品名稱

          錳過氧化物酶(MnP)測(cè)試盒微量法

          規(guī)格

          100管/96樣

          檢測(cè)方法

          微量法

          貨號(hào)

          GOY-SH254

          產(chǎn)品分類

          其它系列

          用途

          僅供科研實(shí)驗(yàn)


          錳過氧化物酶(MnP)測(cè)試盒微量法

          測(cè)定意義:

          錳過氧化物酶(EC1.11.1.13)是一種含亞鐵血紅素的過氧化物酶,主要存在于擔(dān)子菌中,屬于木質(zhì)素降解酶系,能有效的降解木質(zhì)素及廢水和土壤中比較難降解的氯化物,疊氮化合物、DTT,多環(huán)芳烴等。
          測(cè)定原理

          錳過氧化物酶在 Mn2+存在的條件下,將愈創(chuàng)木酚氧化為四鄰甲氧基連酚,在 465nm 有特征吸收峰。
          自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器

          天平、研缽、低溫離心機(jī)、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96 孔板、恒溫水浴鍋。 
          試劑的組成和配制:

          試劑一:液體 110mL×1 瓶,4℃保存。

          試劑二:液體 2mL×1 支,4℃保存。

          試劑三:液體 5mL×1 瓶,4℃避光保存。

          試劑四:液體 2mL×1 支,4℃保存。

          組織樣本的前處理:

          ①總 GAPDH 酶提取:建議稱取約 0.1g 樣本,加入 1mL 提取液一,冰浴勻漿后超聲破碎(冰浴,200W,破碎 3s,間歇 7s,總時(shí)間 1min),然后 4℃,8000g 離心 10min,取上清測(cè)定。

          ②胞漿和葉綠體 GAPDH 酶的分離:按照植物組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10的比例(建議稱取約 0.1g 樣本,加入 1mL 提取液一),冰浴勻漿后于 4℃,200g 離心 5min,棄沉淀,取上清在4℃,8000g 離心 10min,取上清用于測(cè)定胞漿 GAPDH 酶活性,取沉淀加 1mL 提取液二,震蕩溶解后超聲破碎(冰浴,200W,破碎 3s,間歇 7s,總時(shí)間 1min),然后 4℃,8000g 離心 10min,取上清測(cè)定葉綠體中 GAPDH 酶活性。

          建議測(cè)定總 GAPDH 酶活性,按照步驟①提取粗酶液,若需要分別測(cè)定胞漿和葉綠體中的GAPDH,則按照步驟②提取粗酶液。細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞的前處理先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液一體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 提取液一),超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 20%或 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。

          測(cè)定步驟:

          1、 分光光度計(jì)預(yù)熱 30min 以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至 340nm,蒸餾水調(diào)零。

          2、 樣本測(cè)定

          (1)工作液的配制:將試劑二全部倒入試劑一瓶中,充分溶解,37℃(哺乳動(dòng)物)或 25℃(其它物種)預(yù)熱 10 分鐘;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融。

          (2)在試劑三中加入 500μL 蒸餾水,充分混勻待用;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融。

          (3)在 1mL 石英比色皿中加入 30μL 樣本、20μL 試劑三和 950μL 工作液,混勻,加入最后一個(gè)試劑的同時(shí)開始計(jì)時(shí),記錄 340nm 處 20s 時(shí)的吸光值 A1 和 5min20s 后的吸光值

          A2,計(jì)算 ΔA=A1-A2。

          GAPDH 活性計(jì)算

          (1)按樣本蛋白濃度計(jì)算

          單位的定義:每 mg 組織蛋白每分鐘消耗 1 nmol 的 NADH 定義為一個(gè)酶活力單位。GAPDH(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(V 樣×Cpr) ÷T=1072×ΔA÷Cpr

          (2)按樣本鮮重計(jì)算

          單位的定義:每 g 組織每分鐘消耗 1 nmol 的 NADH 定義為一個(gè)酶活力單位。GAPDH(nmol/min /g 鮮重)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(W ×V 樣÷V 樣總) ÷T=1072×ΔA÷W

          (3)按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算

          單位的定義:每一萬個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘消耗 1 nmol 的 NADH 定義為一個(gè)酶活力單位。GAPDH(nmol/min/104cell)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(500 ×V 樣÷V 樣總) ÷T=2.144×ΔAV 反總:反應(yīng)體系總體積,1×10-3L;ε:NADH 摩爾消光系數(shù),6.22×103L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V 樣:加入樣本體積,0.03 mL;V 樣總:加入提取液體積,1 mL;T:反應(yīng)時(shí)間,5 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;500:細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù),500 萬。

          生化檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)操作說明:

          一、抗氧化系列生化檢測(cè)試劑盒

          包括氧化酶(XO)活性分析、超氧陰離子清除能力分析、葡萄糖氧化酶活性(GOD)檢測(cè)、總抗氧化能力(TAC)檢測(cè)、植物原花青素(OPC)含量檢測(cè)、植物類黃酮含量檢測(cè)、植物總酚(TP)含量檢測(cè)試劑盒。

          氧化酶(XO)活性分析試劑盒為例,提供了一種簡(jiǎn)單易用的比色分析法,用于測(cè)定各種樣品中的XO活性,特點(diǎn)是測(cè)定血清,血漿,組織/細(xì)胞裂解物和其他生物體液中的氧化酶活性,以及廣泛的檢測(cè)范圍:15.6 -500 mU/mL。

          二、氧化系列生化檢測(cè)試劑盒

          包括*酶 (CAT) 活性分析、*(H2O2)檢測(cè)、脂質(zhì)過氧化(丙二醛) 分析、蛋白質(zhì)羰基含量檢測(cè)、超氧陰離子含量檢測(cè)等試劑盒。

          蛋白質(zhì)羰基含量檢測(cè)試劑盒(比色法)為例,提供了一種簡(jiǎn)單易用的比色法,用于分析不同生物樣品(細(xì)胞/組織裂解液,生物液體)中蛋白質(zhì)羰基含量。在370 nm處有特征吸收峰。

          特點(diǎn)是:1.測(cè)定組織樣本、細(xì)胞、細(xì)菌、血清等中的蛋白質(zhì)羰基含量。2.樣本處理、實(shí)驗(yàn)步驟以及結(jié)果計(jì)算更加詳盡準(zhǔn)確精煉。3.保質(zhì)期長(zhǎng)。


          錳過氧化物酶(MnP)測(cè)試盒微量法


          三、抗逆系列生化檢測(cè)試劑盒

          包括超氧化物歧化酶 (SOD) 活力檢測(cè)、羥自由基清除能力分析、多酚氧化酶(PPO)活性檢測(cè)、過氧化物酶(POD)活性檢測(cè)等試劑盒。

          超氧化物歧化酶 (SOD) 活力檢測(cè)試劑盒為例,提供一種簡(jiǎn)單易用的比色測(cè)定法,用于定量測(cè)定血清,血漿,組織/細(xì)胞裂解液和其它生物體液中的SOD酶活性。

          特點(diǎn)是:1.測(cè)定血清,血漿,組織/細(xì)胞裂解物和其他生物體液中的SOD酶活性。2.通過WST-8法測(cè)定SOD活性,zui大抑制率可接近100%,不受一些常見干擾因素的干擾。3.廣泛的檢測(cè)范圍:3.13- 200U/mL。

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