產品簡介

木霉屬通用PCR檢測試劑盒品牌是即用型PCR試劑盒的改良產品， 含有Taq DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應緩沖液、PCR 增強劑、上樣染料等所有PCR 所需要的成分，用戶只需加入模板和引物即可進行PCR 反應，具有廣泛的用途。

木霉屬通用PCR檢測試劑盒品牌使用及效果：
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子（約1/4 黃豆大小）或直徑約為0.5-0.7 cm（或面積相當的其他形狀）的植物葉片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中，95℃保溫10-15 分鐘，加入0.1 mL 溶液B，混勻，直接取上清液（相當于PCR 體積的1/10）作為模板進行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。

樣本采集、存放及運輸：
1、樣本采集：各類型樣本按照常規方法采集；
2、存放：樣本在2~8℃條件下保存應不超過72h，-70℃以下可長期保存，但應避免反復凍融（zui多凍融3次）；
3、運輸：采用泡沫箱加冰密封進行運輸。
普通PCR反應流程:
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自備物品：
木霉屬通用PCR檢測試劑盒品牌15毫升錐形離心管：用于制備樣品的容器
比色皿：用于比色的容器
96孔酶標板：用于比色的容器
分光光度儀：用于比色分析
酶標儀：用于微量樣品比色分析
儲存條件：
14℃或－20℃
準備物品
清理液（A）                                   毫升
染色液（t B）                                   微升
稀釋液（C）                                   毫升
溶解液（tD）                                   毫升
產品說明書                                   1份

LoVo(人大腸細胞)5×106cells/瓶×2

Hs 578T(人腺細胞)5×106cells/瓶×2

HCT 116(人結腸細胞)5×106cells/瓶×2

真核細胞膜蛋白抽提試劑（帶酶抑制劑）50次國產

293T/胚腎細胞株國產

大鼠脈絡膜血管細胞*培養基100mL

HBZY-1(大鼠腎小球系膜細胞)5×106cells/瓶×2

甘露醇高鹽瓊脂/甘露醇鹽瓊脂/甘露醇鈉瓊脂/Mannitol Salt Aga金黃色葡萄球菌的選擇性分離培養250克國產/進口

H9c2大鼠心肌細胞（ATCC來源）

小鼠子宮內膜上細胞*培養基100mL

BxPC-3(人原位胰腺腺細胞)5×106cells/瓶×2

木霉屬通用PCR檢測試劑盒品牌Mannan Binding Lectin  甘露聚糖結合凝集素抗體 0.2ml

OVA/SerpinB8  雞卵白蛋白/卵清蛋白抗體 0.1ml

FN/Fibronectin 1  纖維連接蛋白抗體 0.1ml

APOL3  載脂蛋白L3抗體 0.2ml

Bub1  紡錘體檢查點蛋白抗體 0.2ml

phospho-EphB1/Eph receptor B1(Tyr317)  磷酸化酪氨酸蛋白激酶受體B1抗體 0.1ml

NLGN2  神經連接蛋白2抗體 0.2ml

ENO1+ENO2+ENO3  神經元，肌肉特異性烯醇化酶抗體 0.2ml

KLK4  激肽釋放酶4抗體 0.1ml

GABBR2/GB2  G氨基B型受體2抗體 0.1ml

FAAH2  脂肪酸酰胺水解酶2抗體 0.1ml

NME1/Nm23-H1/NDKA  腫瘤抑制基因抗體 0.1ml

反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現非特異條帶。ATGC隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是末及倒數第二個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量產生所需要的結果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。