產(chǎn)品簡介

小泰勒蟲PCR檢測試劑盒品牌是即用型PCR試劑盒的改良產(chǎn)品， 含有Taq DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應緩沖液、PCR 增強劑、上樣染料等所有PCR 所需要的成分，用戶只需加入模板和引物即可進行PCR 反應，具有廣泛的用途。

小泰勒蟲PCR檢測試劑盒品牌使用及效果：
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子（約1/4 黃豆大?。┗蛑睆郊s為0.5-0.7 cm（或面積相當?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中，95℃保溫10-15 分鐘，加入0.1 mL 溶液B，混勻，直接取上清液（相當于PCR 體積的1/10）作為模板進行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。

樣本采集、存放及運輸：
1、樣本采集：各類型樣本按照常規(guī)方法采集；
2、存放：樣本在2~8℃條件下保存應不超過72h，-70℃以下可長期保存，但應避免反復凍融（zui多凍融3次）；
3、運輸：采用泡沫箱加冰密封進行運輸。
普通PCR反應流程:
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自備物品：
小泰勒蟲PCR檢測試劑盒品牌15毫升錐形離心管：用于制備樣品的容器
比色皿：用于比色的容器
96孔酶標板：用于比色的容器
分光光度儀：用于比色分析
酶標儀：用于微量樣品比色分析
儲存條件：
14℃或－20℃
準備物品
清理液（A）                                   毫升
染色液（t B）                                   微升
稀釋液（C）                                   毫升
溶解液（tD）                                   毫升
產(chǎn)品說明書                                   1份

Hep G2(人肝細胞)5×106cells/瓶×2

293(人胚腎細胞)5×106cells/瓶×2

CHO-K1(倉鼠卵巢細胞亞株)5×106cells/瓶×2

小鼠結(jié)腸平滑肌細胞*培養(yǎng)基100mL

769-P(人腎細胞腺細胞)5×106cells/瓶×2

人子宮內(nèi)膜上細胞*培養(yǎng)基100mL

BLB培養(yǎng)基/BLB Medium雙歧桿菌的分離培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進口

人海馬神經(jīng)元

Hela S3(人宮頸細胞)5×106cells/瓶×2

CIN-1I培養(yǎng)基基礎/耶爾森氏菌選擇性瓊脂/孢磺啶苯酚新生霉素瓊脂/CIN Agar分離小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌250克國產(chǎn)/進口

TE671 subline No.2(人橫紋肌肉瘤細胞)5×106cells/瓶×2

小泰勒蟲PCR檢測試劑盒品牌EEF2  真核翻譯延長因子2抗體 0.2ml

FIS1/TTC11  線粒體裂變1蛋白抗體 0.2ml

Phospho-Zyxin (Ser142/Ser143)  磷酸化斑聯(lián)蛋白抗體 0.1ml

Phospho-SHP2/SHIP2(Tyr81)  磷酸化蛋白酪氨酸磷酸酶2抗體 0.1ml

Rabbit anti-Monkey IgM whole serum  兔抗猴IgM抗血清 1ml

RASSF1A  Ras相關(guān)區(qū)域家族1A抗體 0.1ml

APC70/CRSP70  轉(zhuǎn)錄激活蛋白crsp70抗體 0.2ml

GCET1  B淋巴細胞生發(fā)中心相關(guān)蛋白抗體 0.2ml

FKSG14/Centromere protein K  著絲粒蛋白K 0.2ml

phospho-CREM (Ser271 +Ser 274)  磷酸化環(huán)磷酸腺苷反應元件調(diào)節(jié)蛋白抗體 0.1ml

CCDC16/zinc finger protein 830  鋅指蛋白830抗體 0.2ml

phospho-c-Raf(Ser338)  磷酸化原癌基因c-Raf抗體 0.1ml

反應五要素:
參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是末及倒數(shù)第二個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。