產(chǎn)品簡介

塞皮克病毒PCR檢測試劑盒品牌是即用型PCR試劑盒的改良產(chǎn)品， 含有Taq DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應緩沖液、PCR 增強劑、上樣染料等所有PCR 所需要的成分，用戶只需加入模板和引物即可進行PCR 反應，具有廣泛的用途。

塞皮克病毒PCR檢測試劑盒品牌使用及效果：
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子（約1/4 黃豆大小）或直徑約為0.5-0.7 cm（或面積相當?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中，95℃保溫10-15 分鐘，加入0.1 mL 溶液B，混勻，直接取上清液（相當于PCR 體積的1/10）作為模板進行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。

樣本采集、存放及運輸：
1、樣本采集：各類型樣本按照常規(guī)方法采集；
2、存放：樣本在2~8℃條件下保存應不超過72h，-70℃以下可長期保存，但應避免反復凍融（zui多凍融3次）；
3、運輸：采用泡沫箱加冰密封進行運輸。
普通PCR反應流程:
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自備物品：
塞皮克病毒PCR檢測試劑盒品牌15毫升錐形離心管：用于制備樣品的容器
比色皿：用于比色的容器
96孔酶標板：用于比色的容器
分光光度儀：用于比色分析
酶標儀：用于微量樣品比色分析
儲存條件：
14℃或－20℃
準備物品
清理液（A）                                   毫升
染色液（t B）                                   微升
稀釋液（C）                                   毫升
溶解液（tD）                                   毫升
產(chǎn)品說明書                                   1份

RSC, 大鼠雪旺細胞

IM-9(人外周血B淋巴細胞)5×106cells/瓶×2

NCI-H295R(人腎上腺質(zhì)腺細胞)5×106cells/瓶×2gersion

T84(人結(jié)腸腺肺轉(zhuǎn)移細胞)5×106cells/瓶×2

293T(人胚腎細胞)5×106cells/瓶×2

大鼠卵巢顆粒細胞*培養(yǎng)基100mL

Hacat(人永生角質(zhì)形成細胞)5×106cells/瓶×2

myc標簽免疫親和介質(zhì)125ul國產(chǎn)gersion

SGC7901(人胃細胞)5×106cells/瓶×2

IV型膠原酶(含100mL酶解緩沖液)10mL

CT26.WT(小鼠結(jié)腸細胞)5×106cells/瓶×2

塞皮克病毒PCR檢測試劑盒品牌GIPC-2  胞漿區(qū)相關(guān)蛋白GIPC2抗體 0.2ml

CYP19/CYP19A1  細胞色素P450 19抗體 0.1ml

AIMP3/p18  抑癌蛋白AIMP3抗體 0.2ml

CEA(B5)  癌胚抗原單克隆抗體（檢測） 0.1ml

Rabbit Anti-Goat IgG/HRP  辣根過氧化物酶標記的兔抗羊IgG 0.1ml

KIST/UHMK1  絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶KIST抗體（激酶相互作用與白血病相關(guān)基因） 0.2ml

Phospho-SGK1 (Ser78)  磷酸化糖皮質(zhì)激素調(diào)節(jié)激酶1抗體 0.1ml

Goat anti-Bovine IgG whole serum  羊抗牛IgG抗血清 1ml

ELAVL1/HuR  ELAVL1抗體 0.2ml

CHD3  ATP依賴的解旋酶CHD3抗體 0.2ml

CHK2  細胞周期檢測點激酶2抗體 0.1ml

NEGR1  神經(jīng)生長調(diào)節(jié)蛋白1抗體 0.2ml

反應五要素:
參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是末及倒數(shù)第二個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。