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          當前位置:首頁產品中心生化檢測試劑盒分光光度法葡萄糖含量測試盒可見分光光度法
          葡萄糖含量測試盒可見分光光度法

          產品簡介

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          產品廠地:上海市
          更新時間:2025-03-03
          廠商性質:經銷商
          訪問量:376
          詳細介紹在線留言
          品牌其他品牌貨號GOY-SH271-B
          規格50管/48樣供貨周期現貨
          主要用途僅供科研研究實驗應用領域生物產業
          檢測方法可見分光光度法產品類別糖代謝系列
          品牌谷研貨期現貨

          正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定

          商品屬性:

          產品名稱

          葡萄糖含量測試盒可見分光光度法

          規格

          50管/48樣

          檢測方法

          可見分光光度法

          貨號

          GOY-SH271-B

          產品分類

          糖代謝系列

          用途

          僅供科研實驗


          葡萄糖含量測試盒可見分光光度法

          測定意義:

          葡萄糖不僅是細胞能量代謝的主要底物,而且其代謝中間產物是生物合成的重要底物。植物可通過光合作用產生葡萄糖。就哺乳動物而言,葡萄糖不僅是大腦神經系統、肌肉、脂肪組織等的能源,而且與還原性輔酶、乳糖和乳脂的合成密切相關。

          測定原理

          葡萄糖氧化酶催化葡萄糖氧化成葡萄糖酸,并產生*;過氧化物酶催化*氧化4-氨基安替比偶聯酚,生成有色化合物,在505 nm有特征吸收峰。

          需自備的儀器和用品

          可見分光光度計、水浴鍋、可調式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽和蒸餾水

          試劑的組成和配制:

          提取液一:液體 25mL×1 瓶,4℃保存。

          提取液二:液體 25mL×1 瓶,4℃保存。

          試劑一:粉劑×1 瓶,-20℃保存;

          試劑二:液體 25mL×1 瓶,4℃保存;

          試劑三:液體 14μL×1 支,4℃保存;

          組織樣本的前處理:

          ①總 GAPDH 酶提取:建議稱取約 0.1g 樣本,加入 1mL 提取液一,冰浴勻漿后超聲破碎(冰浴,200W,破碎 3s,間歇 7s,總時間 1min),然后 4℃,8000g 離心 10min,取上清測定。

          ②胞漿和葉綠體 GAPDH 酶的分離:按照植物組織質量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10的比例(建議稱取約 0.1g 樣本,加入 1mL 提取液一),冰浴勻漿后于 4℃,200g 離心 5min,棄沉淀,取上清在4℃,8000g 離心 10min,取上清用于測定胞漿 GAPDH 酶活性,取沉淀加 1mL 提取液二,震蕩溶解后超聲破碎(冰浴,200W,破碎 3s,間歇 7s,總時間 1min),然后 4℃,8000g 離心 10min,取上清測定葉綠體中 GAPDH 酶活性。

          建議測定總 GAPDH 酶活性,按照步驟①提取粗酶液,若需要分別測定胞漿和葉綠體中的GAPDH,則按照步驟②提取粗酶液。細菌或培養細胞的前處理先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細菌或細胞數量(104個):提取液一體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬細菌或細胞加入 1mL 提取液一),超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 20%或 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復 30 次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

          測定步驟:

          1、 分光光度計預熱 30min 以上,調節波長至 340nm,蒸餾水調零。

          2、 樣本測定

          (1)工作液的配制:將試劑二全部倒入試劑一瓶中,充分溶解,37℃(哺乳動物)或 25℃(其它物種)預熱 10 分鐘;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復凍融。

          (2)在試劑三中加入 500μL 蒸餾水,充分混勻待用;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復凍融。

          (3)在 1mL 石英比色皿中加入 30μL 樣本、20μL 試劑三和 950μL 工作液,混勻,加入最后一個試劑的同時開始計時,記錄 340nm 處 20s 時的吸光值 A1 和 5min20s 后的吸光值

          A2,計算 ΔA=A1-A2。

          GAPDH 活性計算

          (1)按樣本蛋白濃度計算

          單位的定義:每 mg 組織蛋白每分鐘消耗 1 nmol 的 NADH 定義為一個酶活力單位。GAPDH(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(V 樣×Cpr) ÷T=1072×ΔA÷Cpr

          (2)按樣本鮮重計算

          單位的定義:每 g 組織每分鐘消耗 1 nmol 的 NADH 定義為一個酶活力單位。GAPDH(nmol/min /g 鮮重)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(W ×V 樣÷V 樣總) ÷T=1072×ΔA÷W

          (3)按細菌或細胞密度計算

          單位的定義:每一萬個細菌或細胞每分鐘消耗 1 nmol 的 NADH 定義為一個酶活力單位。GAPDH(nmol/min/104cell)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(500 ×V 樣÷V 樣總) ÷T=2.144×ΔAV 反總:反應體系總體積,1×10-3L;ε:NADH 摩爾消光系數,6.22×103L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V 樣:加入樣本體積,0.03 mL;V 樣總:加入提取液體積,1 mL;T:反應時間,5 min;Cpr:樣本蛋白質濃度,mg/mL;W:樣本質量,g;500:細菌或細胞總數,500 萬。

          生化檢測試劑盒實驗操作說明:

          一、抗氧化系列生化檢測試劑盒

          包括氧化酶(XO)活性分析、超氧陰離子清除能力分析、葡萄糖氧化酶活性(GOD)檢測、總抗氧化能力(TAC)檢測、植物原花青素(OPC)含量檢測、植物類黃酮含量檢測、植物總酚(TP)含量檢測試劑盒。

          氧化酶(XO)活性分析試劑盒為例,提供了一種簡單易用的比色分析法,用于測定各種樣品中的XO活性,特點是測定血清,血漿,組織/細胞裂解物和其他生物體液中的氧化酶活性,以及廣泛的檢測范圍:15.6 -500 mU/mL。

          二、氧化系列生化檢測試劑盒

          包括*酶 (CAT) 活性分析、*(H2O2)檢測、脂質過氧化(丙二醛) 分析、蛋白質羰基含量檢測、超氧陰離子含量檢測等試劑盒。

          蛋白質羰基含量檢測試劑盒(比色法)為例,提供了一種簡單易用的比色法,用于分析不同生物樣品(細胞/組織裂解液,生物液體)中蛋白質羰基含量。在370 nm處有特征吸收峰。

          特點是:1.測定組織樣本、細胞、細菌、血清等中的蛋白質羰基含量。2.樣本處理、實驗步驟以及結果計算更加詳盡準確精煉。3.保質期長。


          葡萄糖含量測試盒可見分光光度法


          三、抗逆系列生化檢測試劑盒

          包括超氧化物歧化酶 (SOD) 活力檢測、羥自由基清除能力分析、多酚氧化酶(PPO)活性檢測、過氧化物酶(POD)活性檢測等試劑盒。

          超氧化物歧化酶 (SOD) 活力檢測試劑盒為例,提供一種簡單易用的比色測定法,用于定量測定血清,血漿,組織/細胞裂解液和其它生物體液中的SOD酶活性。

          特點是:1.測定血清,血漿,組織/細胞裂解物和其他生物體液中的SOD酶活性。2.通過WST-8法測定SOD活性,zui大抑制率可接近100%,不受一些常見干擾因素的干擾。3.廣泛的檢測范圍:3.13- 200U/mL。

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