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          PRODUCTS CENTER

          產(chǎn)品中心

          當(dāng)前位置:首頁產(chǎn)品中心科研細(xì)胞細(xì)胞系MET-5A(間皮細(xì)胞)
          MET-5A(間皮細(xì)胞)

          產(chǎn)品簡介

          MET-5A(間皮細(xì)胞)的相關(guān)*:遠(yuǎn)西方雜交(FAR WESTERN BLOT) 印跡同位素檢測試劑盒 5次
          印跡覆膜結(jié)合(BLOT OVERLAY BINDING)同位素檢測試劑盒 5次
          遠(yuǎn)西方雜交(FAR WESTERN BLOT) 印跡消除 20次
          試劑盒
          蛋白質(zhì)西方雜交10倍印跡膜轉(zhuǎn)移緩沖液 500毫升
          蛋白質(zhì)西方雜交10倍清理緩沖液 500毫升

          產(chǎn)品廠地:上海市
          更新時間:2025-02-28
          廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
          訪問量:475
          詳細(xì)介紹在線留言
          品牌其他品牌貨號GOY-01X0649
          規(guī)格1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶供貨周期現(xiàn)貨
          主要用途產(chǎn)品僅供科研使用應(yīng)用領(lǐng)域化工

          產(chǎn)品屬性: 

          產(chǎn)品名稱

          規(guī)格

          貨號

          MET-5A(間皮細(xì)胞)

          1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

          GOY-01X0649

          商品介紹:

          名稱    MET-5A(間皮細(xì)胞) 

          種屬人類

          年齡(性別)不詳

          組織來源未知

          生長特性貼壁細(xì)胞

          細(xì)胞形態(tài)上皮細(xì)胞樣

          生長培養(yǎng)基M199(PM150610)+10% FBS(164210-50)+ ITS+3.3 nM EGF+400 nM hydrocortisone+1%P/S

          推薦傳代比例1:2-1:4

          推薦換液頻率2~3/

          凍存條件

          凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

          溫度:液氮

          培養(yǎng)條件

          氣相:空氣,95%CO25%

          冷凍保存細(xì)胞之方法?

          冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

          冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

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          實驗要點及說明:

          1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;

          2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;

          3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

          4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機(jī)率;

          5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

          實驗報告:

          一、分離與培養(yǎng):

          1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;

          2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

          3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

          4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

          5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

          二、免疫熒光鑒定:

          1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

          2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

          3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

          4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

          5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

          6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

           IKB alpha / NFKBIA 基因全長ORF克隆

           NR3C1 基因全長ORF克隆

           CYP3A4 基因全長ORF克隆

           GSTM2 轉(zhuǎn)錄變體1 基因全長ORF克隆

           MLH1 基因全長ORF克隆

           COMT 基因全長ORF克隆

           FGG 基因全長ORF克隆

           GBA 基因全長ORF克隆

           HEXA 基因全長ORF克隆

           PTGS2 基因全長ORF克隆

          MET-5A(間皮細(xì)胞)15.6-1000 U/L 人胞外超氧化物歧化(SOD3)ELISA試劑盒

          7.8-500 pg/mL. 人周期素依賴性激2C(CDKN2C)ELISA試劑盒

          0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Mitochondrial uncoupling protein 2

          液體菌種保存管(副溶)(不含瓷珠) 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:1.4ml*50支

          0.39-25 ng/mL ELISA Kit for Human Disintegrin and metalloproteinase domain-containing protein 9

          15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Human Calponin-2

          15.6-1000 pg/mL 人角化細(xì)胞生長因子(KGF)ELISA試劑盒

          12.5-800 ng/mL 人富組蛋白(HTN-3)ELISA試劑盒

          0.78-50 ng/mL 人T-細(xì)胞表面糖蛋白CD4(T-cell surface glycoprotein CD4) ELISA試劑盒

          0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human UDP-glucuronosyltransferase 1-1

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