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          PRODUCTS CENTER

          產(chǎn)品中心

          當(dāng)前位置:首頁產(chǎn)品中心科研細(xì)胞原代細(xì)胞小鼠精原干細(xì)胞
          小鼠精原干細(xì)胞

          產(chǎn)品簡介

          小鼠精原干細(xì)胞的相關(guān)*:大量真/酵母細(xì)胞基因組DNA純化試劑盒 10次
          裂解液IX:真/酵母細(xì)胞裂解液 50次
          裂解液IX:真/酵母細(xì)胞強裂解液 20次
          真/酵母細(xì)胞可溶性總蛋白制備試劑盒 20次
          真/酵母細(xì)胞可溶性總核蛋白制備試劑盒 20次
          真/酵母細(xì)胞漿可溶性總蛋白制備試劑盒 20次

          產(chǎn)品廠地:上海市
          更新時間:2025-02-27
          廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
          訪問量:337
          詳細(xì)介紹在線留言
          品牌其他品牌貨號GOY-01X1173
          規(guī)格5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶供貨周期現(xiàn)貨
          主要用途產(chǎn)品僅供科研使用應(yīng)用領(lǐng)域化工

          產(chǎn)品屬性: 

          產(chǎn)品名稱

          規(guī)格

          貨號

          小鼠精原干細(xì)胞

          5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

          GOY-01X1173

          商品介紹:

          名稱    小鼠精原干細(xì)胞 

          2.組織來源:睪丸組織

          3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

          4.細(xì)胞簡介:

          小鼠精原干細(xì)胞分離自睪丸組織;精原干細(xì)胞是位于睪丸生精小管的生精上皮內(nèi)的一群生精干細(xì)胞,是成體內(nèi)的定向干細(xì)胞。精原干細(xì)胞的一些*優(yōu)勢使其成為動物轉(zhuǎn)基因的理想宿主細(xì)胞。精原干細(xì)胞的生理生化特性及其分裂增殖、分化等多項生命活動的調(diào)節(jié)機制的深入研究,發(fā)生機理的進一步闡明以及精原干細(xì)胞轉(zhuǎn)染,異體、異種移植技術(shù)的實際應(yīng)用,都迫切需要找到一種可行的方法將其分離純化,以期得到較高產(chǎn)量和純度的有活力的精原細(xì)胞用于體外培養(yǎng)。在哺乳動睪丸內(nèi),發(fā)生時一個受高度調(diào)控和持續(xù)的過程,精原干細(xì)胞(SSCs)一方面進行自我更新維持干細(xì)胞數(shù)量,另一方面又不斷執(zhí)行分化成各級生精細(xì)胞直至最后生成。精原干細(xì)胞定居在曲精細(xì)管上皮的基膜處,是哺乳動物發(fā)生的最原始細(xì)胞,也是動物體內(nèi)一起能將遺傳信息傳遞的干細(xì)胞。精原干細(xì)胞體外培養(yǎng)體系的建立,在生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、畜牧業(yè)及制備轉(zhuǎn)基因動物等領(lǐng)域具有廣闊的應(yīng)用前景。精原干細(xì)胞(SSCs)是生精上皮近基底膜的一群細(xì)胞,具有自我更新能力和多向分化潛能,是哺乳動物體內(nèi)能將遺傳信息傳遞給下一代的成體干細(xì)胞。

          5.方法簡介:

          實驗室分離的小鼠精原干細(xì)胞采用先機械吹打、后胰蛋白酶消化,結(jié)合Percoll密度梯度離心法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

          6.質(zhì)量檢測:

          實驗室分離的小鼠精原干細(xì)胞經(jīng)CD44免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

          7.培養(yǎng)信息:

          培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

          產(chǎn)品貨號CM-M160

          換液頻率每2-3天換液一次

          生長特性懸浮

          細(xì)胞形態(tài)球形

          傳代特性可傳2-3代左右

          消化液0.25%胰蛋白酶

          培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%CO25%

          冷凍保存細(xì)胞之方法?

          冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

          冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

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          實驗要點及說明:

          1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;

          2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;

          3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

          4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;

          5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

          實驗報告:

          一、分離與培養(yǎng):

          1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;

          2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

          3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

          4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

          5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

          二、免疫熒光鑒定:

          1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

          2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

          3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

          4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

          5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

          6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

           Integrin beta1 轉(zhuǎn)錄變體1A 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽

           KIT 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶Myc標(biāo)簽

          食蟹猴 BTLA 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶His標(biāo)簽

           Integrin beta1 轉(zhuǎn)錄變體1A 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶HA標(biāo)簽

           RAC1 / MIG5 轉(zhuǎn)錄變體Rac1 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶Myc標(biāo)簽

          小鼠 IL2RB / CD122 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶His標(biāo)簽

           MAP3K8 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶His標(biāo)簽

           GDF-15 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽

           VASN 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶Myc標(biāo)簽

           DIXDC1 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽

          小鼠精原干細(xì)胞組織相容性復(fù)合體α抗體Human SEC5/EXOC2 ELISA Kit相關(guān)抗體流式組化 XR0280R(抗大鼠)

          肝生長因子激活抑制蛋白2抗體Human SEC61alpha ELISA Kitsrc原癌基因抗體流式組化

          HOMER2抗體Human SDR42E1 ELISA KitL-天冬二甲酯鹽酸鹽

          瘤病調(diào)控因子1抗體(鋅指蛋白395)Human SDCCAG8 ELISA KitBOC-L-天冬

          人類狀瘤病18 E6單克隆抗體Human SCN4B ELISA Kit胰凝乳蛋白(牛)

          異質(zhì)核糖核蛋白F抗體Human SDCCAG10 ELISA Kit卵白素(雞蛋)

          異質(zhì)核糖核蛋白K抗體Human SCNM1 ELISA Kit透明質(zhì)酸鈉

          異質(zhì)核糖核蛋白L抗體Human SCNN1A ELISA Kit鈉

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