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          PRODUCTS CENTER

          產(chǎn)品中心

          當(dāng)前位置:首頁產(chǎn)品中心科研細胞細胞系WERI-Rb-1 (視網(wǎng)膜神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞)
          WERI-Rb-1 (視網(wǎng)膜神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞)

          產(chǎn)品簡介

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          細胞IL蛋白表達流式細胞儀檢測試劑盒 1

          產(chǎn)品廠地:上海市
          更新時間:2025-02-27
          廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
          訪問量:443
          詳細介紹在線留言
          品牌其他品牌貨號GOY-01X0461
          規(guī)格1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶供貨周期現(xiàn)貨
          主要用途產(chǎn)品僅供科研使用應(yīng)用領(lǐng)域化工

          產(chǎn)品屬性: 

          產(chǎn)品名稱

          規(guī)格

          貨號

          WERI-Rb-1 (視網(wǎng)膜神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞)

          1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

          GOY-01X0461

          商品介紹:

          名稱    WERI-Rb-1 (視網(wǎng)膜神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞)  

          別稱WERI-RB-1; WERI-Rb 1; WERI-Rb1; WERI-RB1; WERI Rb-1; WERI; Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1

          種屬人類

          年齡(性別)女性,1

          組織來源眼睛,視網(wǎng)膜

          生長特性懸浮細胞

          細胞形態(tài)圓形(葡萄狀)

          背景描述WERI-Rb-1細胞是由R·M·McFallT·W·Sery1974年建立的兩株人眼癌細胞系中的一株。WERI-Rb-1細胞能在Difco Bacto-Agar中存活但不形成克隆。掃描電鏡顯示,在WERI-Rb-1細胞表面囊泡、板狀偽足和微絨毛在數(shù)量上和頻率上的改變。細胞分化研究,的動物模型和生化評價都涉及WERI-Rb-1細胞。

          生物安全等級1

          生長培養(yǎng)基RPMI-164010% FBS1% P/S

          推薦傳代比例3×10^5-5×10^5cells/mL

          推薦換液頻率2~3/

          凍存條件

          凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

          溫度:液氮

          培養(yǎng)條件

          氣相:空氣,95%;CO2,5%

          溫度:37℃

          注意事項該細胞為懸浮細胞,請注意離心收集細胞懸液;請勿直接倒掉細胞培養(yǎng)液。

          冷凍保存細胞之方法?

          冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

          冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

          QQ截圖20210907103850.png

          實驗要點及說明:

          1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;

          2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;

          3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

          4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;

          5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

          實驗報告:

          一、分離與培養(yǎng):

          1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大??;

          2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

          3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

          4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

          5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

          二、免疫熒光鑒定:

          1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

          2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

          3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

          4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

          5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

          6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

           ARMCX6 基因全長ORF克隆

           CENPO 基因全長ORF克隆

           NMRAL1 基因全長ORF克隆

           PEX19 基因全長ORF克隆

           HOXD3 基因全長ORF克隆

           ACADL 基因全長ORF克隆

           AMDHD1 基因全長ORF克隆

           VAT1L 基因全長ORF克隆

           ACAA1 基因全長ORF克隆

           KLF15 基因全長ORF克隆

          WERI-Rb-1 (視網(wǎng)膜神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞) 2 ug pECFP-Peroxi pECFP-Peroxi 低溫運輸,-20℃保存

          ITC肉湯添加劑 ITC Broth Additive 1ml*5

          100mg 鏈脲佐菌素 Streptozocin STZ -20℃保存

          營養(yǎng)瓊脂 Nutrient Agar 250g

          1瓶 KG-1細胞株 KG-1 低溫運輸和保存

          食品衛(wèi)生檢驗系列  

          5g 吖啶橙 Acridine Orange 避光保存

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