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          PRODUCTS CENTER

          產(chǎn)品中心

          當(dāng)前位置:首頁產(chǎn)品中心科研細(xì)胞原代細(xì)胞大鼠骨內(nèi)膜間充質(zhì)干細(xì)胞
          大鼠骨內(nèi)膜間充質(zhì)干細(xì)胞

          產(chǎn)品簡介

          大鼠骨內(nèi)膜間充質(zhì)干細(xì)胞的相關(guān)*:真/酵母細(xì)胞線粒體分離(粗提)試劑盒 10次
          真/酵母細(xì)胞線粒體分離(活性)試劑盒 10次
          真/酵母細(xì)胞線粒體分離(高純)試劑盒 10次
          同位素真/酵母細(xì)胞蛋白核酸結(jié)合凝膠遷移電泳分析試劑盒 20次
          生物素真/酵母細(xì)胞蛋白核酸結(jié)合凝膠遷移電泳分析試劑盒 20次
          可溶性真/酵母細(xì)胞膜蛋白(粗提)制備試劑盒 20次

          產(chǎn)品廠地:上海市
          更新時(shí)間:2025-02-27
          廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
          訪問量:418
          詳細(xì)介紹在線留言
          品牌其他品牌貨號GOY-01X1175
          規(guī)格5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶供貨周期現(xiàn)貨
          主要用途產(chǎn)品僅供科研使用應(yīng)用領(lǐng)域化工

          實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:

          1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;

          2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;

          3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動作要輕;

          4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;

          5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

          產(chǎn)品屬性:  

          產(chǎn)品名稱

          規(guī)格

          貨號

          大鼠骨內(nèi)膜間充質(zhì)干細(xì)胞

          5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

          GOY-01X1175

          商品介紹:

          名稱    大鼠骨內(nèi)膜間充質(zhì)干細(xì)胞  

          2.組織來源:股骨、脛骨

          3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

          4.細(xì)胞簡介:

          大鼠骨內(nèi)膜間充質(zhì)干細(xì)胞分離自股骨、脛骨;骨內(nèi)膜是一層致密結(jié)締組織膜,覆蓋在骨的表面(關(guān)節(jié)面除外),新鮮骨內(nèi)膜呈粉紅色,含有豐富的血管、神經(jīng)和成骨細(xì)胞。此外,附著于骨的肌腱、韌帶于附著部位都與骨內(nèi)膜編織在一起。因而骨內(nèi)膜與骨質(zhì)結(jié)合甚為牢固。骨內(nèi)膜富含血管、神經(jīng),通過骨質(zhì)的滋養(yǎng)孔分布于骨質(zhì)和骨髓。骨內(nèi)膜分內(nèi)、外兩層,外層主要是粗大的膠原纖維束,部分纖維穿入骨質(zhì),使骨內(nèi)膜固定于骨面;內(nèi)層疏松,含成骨細(xì)胞和破骨細(xì)胞(分別具有產(chǎn)生新骨質(zhì)和改建骨的功能)。骨髓腔和骨松質(zhì)的網(wǎng)眼也襯著一層菲薄的結(jié)締組織膜,叫做骨膜。骨內(nèi)膜的內(nèi)層和骨膜有分化成骨細(xì)胞和破骨細(xì)胞的能力,以形成新骨質(zhì)和破壞、改造已生成的骨質(zhì),所以對骨的發(fā)生、生長、修復(fù)等具有重要意義。骨內(nèi)膜間充質(zhì)干細(xì)胞是一種具有高度自我更新能力和多向分化潛能的干細(xì)胞,可以向骨、軟骨、肌組織、皮膚、脂肪、神經(jīng)等多種組織分化,因此可以作為組織工程中的種子細(xì)胞。骨內(nèi)膜間充質(zhì)干細(xì)胞的體外培養(yǎng)條件要求較高,在培養(yǎng)過程中,受貼壁時(shí)間、種植密度、血清含量、培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)基pH值等條件的影響。

          5.方法簡介:

          實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠骨內(nèi)膜間充質(zhì)干細(xì)胞采用沖洗骨髓、消化骨內(nèi)膜、差速貼壁法結(jié)合培養(yǎng)基篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

          6.質(zhì)量檢測:

          實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠骨內(nèi)膜間充質(zhì)干細(xì)胞經(jīng)CD90免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

          7.培養(yǎng)信息:

          培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

          產(chǎn)品貨號CM-R161

          換液頻率每2-3天換液一次

          生長特性貼壁

          細(xì)胞形態(tài)成纖維細(xì)胞樣

          傳代特性可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳

          消化液0.25%胰蛋白酶

          培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%CO25%

          冷凍保存細(xì)胞之方法?

          冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

          冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí), 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

          QQ截圖20210907103850.png

          實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

          一、分離與培養(yǎng):

          1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;

          2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

          3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

          4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

          5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

          二、免疫熒光鑒定:

          1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

          2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

          3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

          4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

          5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

          6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

           MTOR 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶Myc標(biāo)簽

           MTOR 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶His標(biāo)簽

           MTOR 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽

           TrkA / NTRK1 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶HA標(biāo)簽

           TGF-beta 1 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶Myc標(biāo)簽

           CCL20 轉(zhuǎn)錄變體2 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽

           HGF 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶His標(biāo)簽

           TNFSF10 / TRAIL 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽

          甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/1/2013) 核蛋白 (Nucleoprotein / NP) 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體, 密碼子優(yōu)化), 無標(biāo)簽

          甲型流感 H7N9 (A/Anhui/1/2013) 核蛋白 (Nucleoprotein / NP) 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體, 密碼子優(yōu)化), 無標(biāo)簽

          大鼠骨內(nèi)膜間充質(zhì)干細(xì)胞肉桂 分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99.5%(GC)香葉  98%Anti-CYP2C19  色素P450 2C19抗體

          肉桂酸 ≥99.0%, FG香葉  97%Anti-CYP450  色素P450單氧化抗體

          肉桂酸 天然, ≥99%, FCC香葉  Standard for GC, ≥99.0% (GC)Anti-Cyr61/IGFBP10/CCN1  富半胱肝素結(jié)合蛋白61抗體

          香茅  85%,FCC乙酸香葉酯 96%Anti-CYP2E1  抗色素P450ⅡE1抗體

          香茅  96%乙酸香葉酯 90%,天然, FCC, Kosher Anti-Cytochrome C  色素 C抗體

          肉桂 98%香葉基酮 97%Anti-Phospho-Dab1 (Tyr220)   化Disabled 1抗體

          肉桂 分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99%(GC)甲酸香葉酯 85%Anti-Phospho-Dab1 (Tyr232)  化Disabled 1抗體

          正癸 Standard for GC,≥99.5% (GC)甲酸香葉酯 85%,FCC, KosherAnti-Phospho-Dab1 (Ser491)  化Disabled 1抗體


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