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          PRODUCTS CENTER

          產(chǎn)品中心

          當(dāng)前位置:首頁產(chǎn)品中心科研細(xì)胞原代細(xì)胞大鼠主動(dòng)脈外膜成纖維細(xì)胞
          大鼠主動(dòng)脈外膜成纖維細(xì)胞

          產(chǎn)品簡(jiǎn)介

          大鼠主動(dòng)脈外膜成纖維細(xì)胞的相關(guān)*:小鼠組織因子途徑抑制物(TFPI)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝
          小鼠組織型纖溶原激活劑(t-PA)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝
          小鼠組織多肽抗原(TPA)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
          小鼠組織蛋白去乙酰化2(Hdac2/Yy1bp)免疫試劑盒*直銷
          小鼠組織蛋白K(cath-K)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

          產(chǎn)品廠地:上海市
          更新時(shí)間:2025-02-24
          廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
          訪問量:332
          詳細(xì)介紹在線留言
          品牌其他品牌貨號(hào)GOY-01X1323
          規(guī)格5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶供貨周期現(xiàn)貨
          主要用途產(chǎn)品僅供科研使用應(yīng)用領(lǐng)域化工

          冷凍保存細(xì)胞之方法?

          冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲(chǔ)存。

          冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí), 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

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          產(chǎn)品屬性:   

          產(chǎn)品名稱

          規(guī)格

          貨號(hào)

          大鼠主動(dòng)脈外膜成纖維細(xì)胞

          5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

          GOY-01X1323

          商品介紹:

          名稱    大鼠主動(dòng)脈外膜成纖維細(xì)胞   

          2.組織來源:主動(dòng)脈組織

          3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

          4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

          大鼠主動(dòng)脈外膜成纖維細(xì)胞分離自主動(dòng)脈血管外膜組織;血管外膜是由疏松結(jié)締組織組成,其中含螺旋狀或縱向分布的彈性纖維和膠原纖維。血管壁的結(jié)締組織細(xì)胞以成纖維細(xì)胞為主,當(dāng)血管受損傷時(shí),成纖維細(xì)胞具有修復(fù)外膜的能力。有的動(dòng)脈中膜和外膜的交界處,有密集的彈性纖維組成的外彈性膜。成纖維細(xì)胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來。成纖維細(xì)胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛,細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng),在一定條件下,它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細(xì)胞對(duì)不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的血管外膜成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細(xì)胞基本貼壁*,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團(tuán);細(xì)胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細(xì)胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細(xì)胞質(zhì)透明,細(xì)胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細(xì)胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。血管外膜成纖維細(xì)胞是血管外膜的主要組成細(xì)胞之一,其主要生理功能合成和釋放細(xì)胞外基質(zhì)以及組織損傷后及時(shí)大量聚集修復(fù)損傷組織。

          5.方法簡(jiǎn)介:

          實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠主動(dòng)脈外膜成纖維細(xì)胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合酶消化后差速貼壁制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

          6.質(zhì)量檢測(cè):

          實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠主動(dòng)脈外膜成纖維細(xì)胞經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

          7.培養(yǎng)信息:

          培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

          產(chǎn)品貨號(hào)CM-R219

          換液頻率每2-3天換液一次

          生長特性貼壁

          細(xì)胞形態(tài)成纖維細(xì)胞樣

          傳代特性可傳3-5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳

          消化液0.25%胰蛋白酶

          培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%CO25%

           

          實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:

          1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;

          2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;

          3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;

          4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;

          5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

          實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

          一、分離與培養(yǎng):

          1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;

          2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

          3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

          4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

          5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

          二、免疫熒光鑒定:

          1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

          2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

          3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

          4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

          5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

          6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

          大鼠 CD133 / PROM1 / Prominin 1 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)

          大鼠 CD133 / PROM1 / Prominin 1 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)

          狨猴 IL23A & IL12B Heterodimer 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)

          食蟹猴 IL1R1 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)

          食蟹猴 IL6ST / gp130 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)

          食蟹猴 NKG2A / NKG2 / CD159A / KLRC1 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)

          食蟹猴 LAMP2 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)

          食蟹猴 REG1A / PSPS 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)

          食蟹猴 FGFR4 / FGF Receptor 4 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)

          食蟹猴 XEDAR / EDA2R 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)

          大鼠主動(dòng)脈外膜成纖維細(xì)胞吡咯 99%聚乙烯縮丁 航空級(jí)Anti-NF-66/a-Internexin/FITC  熒光素標(biāo)記α-中連蛋白抗體IgG

          吡咯烷 99%聚乙烯縮丁 M.W.40,000-70,000Anti-NFAM1/CNAIP/FITC  熒光素標(biāo)記NFAM1抗體IgG

          葡萄糖 AR聚乙烯縮丁 M.W.90,000-120,000Anti-NFATc1/FITC  熒光素標(biāo)記活化T核因子1蛋白抗體IgG

          葡萄糖 CP聚乙烯縮丁 M.W.170,000-250,000Anti-NFBD1/MDC1/FITC  熒光素標(biāo)記DNA損傷關(guān)卡蛋白1抗體IgG

          葡萄糖 GR,99%二硅化鉬 99%Anti-p-NFATc2/FITC  熒光素標(biāo)記化NFATc2抗體IgG

          葡萄糖 ACS鋁鎳合金 Ni:47%Anti-NF-H/FITC  熒光素標(biāo)記高分子量神經(jīng)絲蛋白抗體IgG

          葡萄糖 standard for GC, ≥99.5% (GC)氧化鈣 <160 nm particle size (BET), 98%Anti-Phospho-Merlin (Ser518) /FITC  熒光素標(biāo)記化2型神經(jīng)纖維瘤抗體IgG

          葡萄糖 分析標(biāo)準(zhǔn)品氯亞鉑酸銨 鉑含量:52.0%Anti-NF-L/FITC  熒光素標(biāo)記低分子量神經(jīng)絲蛋白抗體IgG

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