小鼠大隱靜脈平滑肌細(xì)胞

產(chǎn)品簡(jiǎn)介
小鼠大隱靜脈平滑肌細(xì)胞的相關(guān)*：組織基質(zhì)金屬蛋白（MMP-9）琥珀酰明膠法比色定量檢測(cè)試劑盒 20次
體液基質(zhì)金屬蛋白（MMP-9）琥珀酰明膠法比色定量檢測(cè)試劑盒 20次
細(xì)胞基質(zhì)金屬蛋白（MMP-2）免疫捕獲檢測(cè)試劑盒 20次
組織基質(zhì)金屬蛋白（MMP-2）免疫捕獲檢測(cè)試劑盒 20次
體液基質(zhì)金屬蛋白（MMP-2）免疫捕獲檢測(cè)試劑盒 20次
細(xì)胞基質(zhì)金屬蛋白（MMP-9）免疫捕獲

產(chǎn)品廠地：上海市

更新時(shí)間：2025-02-24

廠商性質(zhì)：經(jīng)銷商

訪問量：398

產(chǎn)品咨詢 15026555973

產(chǎn)品分類

技術(shù)文章

elisa酶聯(lián)免疫試劑盒價(jià)格實(shí)驗(yàn)室玻璃儀器的單調(diào)

進(jìn)口elisa酶聯(lián)免疫試劑盒閉角型青光眼易感位點(diǎn)的突破

elisa酶聯(lián)免疫試劑盒實(shí)驗(yàn)的特異性強(qiáng)

小鼠成纖維細(xì)胞生長因子4elisa試劑盒樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備步驟

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品牌	其他品牌	貨號(hào)	GOY-01X0961
規(guī)格	5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶	供貨周期	現(xiàn)貨
主要用途	產(chǎn)品僅供科研使用	應(yīng)用領(lǐng)域	化工

產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品名稱	規(guī)格	貨號(hào)
小鼠大隱靜脈平滑肌細(xì)胞	5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶	GOY-01X0961

商品介紹：

名稱 小鼠大隱靜脈平滑肌細(xì)胞

2.組織來源：大隱靜脈組織

3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介：

小鼠大隱靜脈平滑肌細(xì)胞分離自大隱靜脈；大隱靜脈起于足背靜脈弓內(nèi)側(cè)端，經(jīng)內(nèi)踝前方，沿小腿內(nèi)側(cè)緣伴隱神經(jīng)上行，經(jīng)股骨內(nèi)側(cè)髁后方，進(jìn)入大腿內(nèi)側(cè)部，與股內(nèi)側(cè)皮神經(jīng)伴行，逐漸向前上，在恥骨結(jié)節(jié)外下方穿隱靜脈裂孔，匯入股靜脈，其匯入點(diǎn)稱為隱股點(diǎn)。有5條屬支：旋髂淺靜脈、腹壁淺靜脈、外靜脈、股內(nèi)側(cè)淺靜脈和股外側(cè)淺靜脈，它們匯入大隱靜脈的形式多樣，相互間吻合豐富。大隱靜脈曲張行高位結(jié)扎時(shí)，須分別結(jié)扎、切斷各屬支，以防復(fù)發(fā)。大隱靜脈平滑肌細(xì)胞主要功能：①血管平滑肌細(xì)胞的生長潛力是原發(fā)血管病發(fā)的重要異常因素；②參與血管壁的炎癥反應(yīng)，并與血管疾病的進(jìn)展和穩(wěn)定有關(guān)。因此，研究大隱靜脈平滑肌細(xì)胞的代謝和信號(hào)通路是研究大隱靜脈擴(kuò)張等疾病的良好實(shí)驗(yàn)材料。大隱靜脈平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見細(xì)胞貼壁伸展，細(xì)胞形態(tài)大小不一，呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細(xì)胞匯合，多數(shù)細(xì)胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長，高低起伏；細(xì)胞密度低時(shí)，常交織成網(wǎng)狀；密度高時(shí)，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點(diǎn)。

5.方法簡(jiǎn)介：

實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠大隱靜脈平滑肌細(xì)胞采用胰蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè)：

實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠大隱靜脈平滑肌細(xì)胞經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

產(chǎn)品貨號(hào)CM-M078

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細(xì)胞形態(tài)成纖維細(xì)胞樣

傳代特性可傳3代左右

消化液0.25%胰蛋白酶

培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5%

冷凍保存細(xì)胞之方法？

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲(chǔ)存。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下，再放入液氮槽vapor phase長期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí)，以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；

2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；

3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；

4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；

5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

大鼠 CKS1L 基因全長ORF克隆

大鼠 PSME1 基因全長ORF克隆

大鼠 H2AFZ 基因全長ORF克隆

大鼠 BTF3 基因全長ORF克隆

大鼠 AGTRAP 基因全長ORF克隆

大鼠 SARNP 基因全長ORF克隆

大鼠 ANAPC11 基因全長ORF克隆

大鼠 COX4I1 基因全長ORF克隆

大鼠 LOC100911902 基因全長ORF克隆

大鼠 GSTM2 基因全長ORF克隆

小鼠大隱靜脈平滑肌細(xì)胞0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human Heat shock-related 70 kDa protein 2

0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Tissue alpha-L-fucosidase

0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Urea transporter 1

0.156-10 ng/mL 人腺苷酸環(huán)化1(ADCY1)ELISA試劑盒

62.5-4000 nmol/L ELISA Kit for Hydroxyproline

0.156-10 ng/mL 人Ⅰ型脫碘 ELISA試劑盒

0.312-20 nmol/mL 甘油三脂(Triglyceride)ELISA試劑盒

氯化鈉瓊脂培養(yǎng)基(2015藥典) 英文名稱：Mannitol Salt Agar 產(chǎn)品規(guī)格：250g

31.2-2000 pg/mL 人血管動(dòng)蛋白(AMOT)ELISA試劑盒

0.312-20 ng/mL 半(Cysteine)ELISA試劑盒

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