021-39921927
產品簡介
NCI-H23 (非小細胞肺癌細胞) 的相關*：細胞PDGF-A蛋白表達比色法定量檢測試劑盒 10/50 次細胞PDGF-A蛋白表達熒光定量檢測試劑盒 10/50 次PDGF-A蛋白表達西方雜交分析試劑盒 5次PDGF-A蛋白免疫共沉淀分析試劑盒 5次PDGF-A蛋白表達ELISA定量檢測試劑盒 25次細胞PDGF-B蛋白表達流式細胞儀檢測試劑盒 10/20次
| 品牌 | 其他品牌 | 貨號 | GOY-01X0395 |
|---|---|---|---|
| 規格 | 1×10?cells/T25培養瓶 | 供貨周期 | 現貨 |
| 主要用途 | 產品僅供科研使用 | 應用領域 | 化工 |
冷凍保存細胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
產品屬性：
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
| NCI-H23 (非小細胞肺癌細胞) | 1×10?cells/T25培養瓶 | GOY-01X0395 |
商品介紹：
名稱 NCI-H23 (非小細胞肺癌細胞) 別稱NCI.H23; NCI H23; H23; H-23; NCIH23 種屬人類 年齡（性別）男性，51歲 組織來源肺 生長特性貼壁細胞 細胞形態上皮細胞樣 背景描述NCI-H23細胞源于一位51歲患有非小細胞肺癌黑人男性患者的治療前的腫瘤組織，表達C-myc、L-myc、v-src、v-abl、v-erbB、c-raf 1、Ha-ras、Ki-ras、N-ras RNAs；NCI-H23細胞攜帶K-ras 12突變；p53基因246位密碼子突變ATC→ATG；表達PDGF A和B鏈的異源mRNA；表達TGFα、TGFβ和EGFR；角蛋白5、8和18陽性，波形蛋白陽性，神經絲蛋白陰性，巴脫氫酶陰性；據報道，NCI-H23細胞在軟瓊脂中形成克隆的效率為9.7%。 生物安全等級1 生長培養基RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S 推薦傳代比例1:3-1:4 推薦換液頻率2~3次/周 倍增時間~38小時 凍存條件 凍存液：55% 基礎培養基+40%FBS+5%DMSO 溫度：液氮 培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5% 溫度：37℃ 基因表達情況myc+; src+; abl+; erb+; ras+; sis - |
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養，而不適用于懸浮細胞培養，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優質玻璃，并經過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養皿，但不宜過大，以避免培養液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告：
一、分離與培養：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；
5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
ZNRF1 基因全長ORF克隆
RTP2 基因全長ORF克隆
GSTM5 基因全長ORF克隆
NACA2 基因全長ORF克隆
MREG 基因全長ORF克隆
FRMD3 基因全長ORF克隆
MED20 基因全長ORF克隆
EFCAB1 基因全長ORF克隆
RAB1B 基因全長ORF克隆
CT45A5 基因全長ORF克隆
NCI-H23 (非小細胞肺癌細胞) 1瓶 Ramos細胞株 Ramos 低溫運輸和保存
胰蛋白胨大豆瓊脂 5kg/袋
1瓶 Malme-3M細胞株 Malme-3M 低溫運輸和保存
250mL Yeast Lysis Buffer (for mini prep) Yeast Lysis Buffer (for mini prep) 常溫保存
5g 辛甲基硫吡喃葡萄糖苷 OTG 常溫保存
2 ug pVgRXR pVgRXR 低溫運輸，-20℃保存
50次 磁珠植物DNAout MAG Plant DNAOUT 常溫保存（磁珠4℃保存）
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