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          產品中心

          當前位置:首頁產品中心科研細胞原代細胞結腸平滑肌細胞
          結腸平滑肌細胞

          產品簡介

          結腸平滑肌細胞的相關*:硬組織固著液(Susa 固著液) 50毫升
          軟組織固著液(Bouin固著液) 50毫升
          骨組織固著液 50毫升
          活檢組織固著液 50毫升
          抗原保護固著液(10%中性Formalin 固著液) 50毫升
          免疫熒光樣品固著液(Michel固著液) 50毫升

          產品廠地:上海市
          更新時間:2025-02-21
          廠商性質:經銷商
          訪問量:358
          詳細介紹在線留言
          品牌其他品牌貨號GOY-01X0829
          規格5×10?Cells/T25培養瓶供貨周期現貨
          主要用途產品僅供科研使用應用領域化工

          冷凍保存細胞之方法?

          冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

          冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

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          產品屬性:   

          產品名稱

          規格

          貨號

          結腸平滑肌細胞

          5×10?Cells/T25培養瓶

          GOY-01X0829

          商品介紹:

          名稱    結腸平滑肌細胞   

          2.組織來源:結腸組織

          3.產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶

          4.細胞簡介:

          結腸平滑肌細胞分離自結腸組織;結腸在右髂窩內續于盲腸,在第3骶椎平面連接直腸。結腸分升結腸、橫結腸、降結腸和乙狀結腸4部分,大部分固定于腹后壁,結腸的排列酷似英文字母“M",將小腸包圍在內。結腸橫切面由內到外依次為:黏膜(上皮層、固有層、黏膜肌層),黏膜下層(疏松結締組織),肌層(內環形、外縱行兩層平滑肌),外膜(纖維膜或漿膜)。結腸平滑肌細胞主要分布于黏膜肌層和肌層的內環形、外縱行平滑肌;結腸運動少而緩慢,對刺激的反應也較遲緩。結腸平滑肌在食物消化與吸收、腸道運動和物質分泌、誘發全身炎癥反應以及細胞內信號轉導途徑等研究中起著重要的作用。結腸平滑肌細胞原代分離培養3天后,可見細胞貼壁伸展,細胞形態大小不一,呈梭形、不規則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細胞匯合,多數細胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長,高低起伏;細胞密度低時,常交織成網狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態學特征和生長特點。結腸平滑肌運動活性受到神經遞質、胃腸激素和藥物等因素的調節。隨著現代胃腸動力學研究的進展,對胃腸運動的研究已從器官、組織水平發展到細胞、分子水平,要求在胃腸道單個平滑肌細胞標本上來完成各種電生理、藥理和分子生物學等實驗。體外培養細胞,由于影響因素單一,是研究細胞功能以及相應的細胞信號轉導機制的基礎。

          5.方法簡介:

          實驗室分離的人結腸平滑肌細胞采用胰蛋白酶-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

          6.質量檢測:

          實驗室分離的人結腸平滑肌細胞α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

          7.培養信息:

          培養基含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

          產品貨號CM-H037

          換液頻率每2-3天換液一次

          生長特性貼壁

          細胞形態成纖維細胞樣

          傳代特性可傳5代左右;3代以內狀態最佳

          消化液0.25%胰蛋白酶

          培養條件氣相:空氣,95%CO25%

           

          實驗要點及說明:

          1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;

          2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;

          3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

          4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;

          5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

          實驗報告:

          一、分離與培養:

          1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;

          2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

          3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

          4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

          5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

          二、免疫熒光鑒定:

          1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

          2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

          3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

          4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

          5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

          6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

          小鼠 ACPP 基因全長ORF克隆

          小鼠 ACTA1 基因全長ORF克隆

          小鼠 CCNB2 基因全長ORF克隆

          小鼠 ACO2 基因全長ORF克隆

          小鼠 NPY 基因全長ORF克隆

          小鼠 WBSCR22 基因全長ORF克隆

          小鼠 HIST3H2A 基因全長ORF克隆

          小鼠 CDK5R1 基因全長ORF克隆

          小鼠 CCND2 基因全長ORF克隆

          小鼠 H1F0 基因全長ORF克隆

          結腸平滑肌細胞采樣吸收液1-GVPC液體培養基 英文名稱:GVPC Liquid Medium 產品規格:100g

          0.312-20 ng/mL 人β位淀粉樣前體蛋白裂解2(BACE2)ELISA試劑盒

          78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Sphingosine-1-phosphate lyase 1

          NAC液體培養基 英文名稱:NAC Solid Medium 產品規格:250g

          0.625-40 ng/mL ELISA Kit for Human Fibroblast growth factor 4

          15.6-1000 pg/mL 人胱硫醚β合成(CBS)ELISA試劑盒

          1.56-100 ng/ml ELISA Kit for Human Serpin B13

          0.156-10 ng/mL 人DNA(無/無堿基位點)裂解(APEX1)ELISA試劑盒

          3%NaCl堿性蛋白胨水 英文名稱: 產品規格:9ml*10支

          0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human 1-phosphatidylinositol-4, 5-bisphosphate phosphodiesterase gamma-1

           


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