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          PRODUCTS CENTER

          產(chǎn)品中心

          當(dāng)前位置:首頁產(chǎn)品中心科研細(xì)胞原代細(xì)胞大鼠微血管周細(xì)胞
          大鼠微血管周細(xì)胞

          產(chǎn)品簡(jiǎn)介

          大鼠微血管周細(xì)胞的相關(guān)*:通用型WNV(WEST NILE)病毒定量PCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒 20次
          細(xì)胞WNV(WEST NILE)病毒定量PCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒 20次
          組織WNV(WEST NILE)病毒定量PCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒 20次
          體液WNV(WEST NILE)病毒定量PCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒 20次
          WNV(WEST NILE)病毒標(biāo)準(zhǔn)曲線定量PCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒 2次
          通用

          產(chǎn)品廠地:上海市
          更新時(shí)間:2025-02-21
          廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
          訪問量:361
          詳細(xì)介紹在線留言
          品牌其他品牌貨號(hào)GOY-01X1247
          規(guī)格5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶供貨周期現(xiàn)貨
          主要用途產(chǎn)品僅供科研使用應(yīng)用領(lǐng)域化工

          冷凍保存細(xì)胞之方法?

          冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。

          冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí), 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

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          產(chǎn)品屬性:   

          產(chǎn)品名稱

          規(guī)格

          貨號(hào)

          大鼠微血管周細(xì)胞

          5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

          GOY-01X1247

          商品介紹:

          名稱    大鼠微血管周細(xì)胞   

          2.組織來源:微血管組織

          3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

          4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

          大鼠微血管周細(xì)胞分離自微血管組織;周細(xì)胞(pericyte)又稱Rouget細(xì)胞和壁細(xì)胞,是一種包圍全身毛細(xì)血管和靜脈中內(nèi)皮細(xì)胞的細(xì)胞,可以收縮。周細(xì)胞嵌入毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞的基膜中,通過物理接觸和旁分泌信號(hào)與內(nèi)皮細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞通訊,監(jiān)視和穩(wěn)定內(nèi)皮細(xì)胞的成熟過程。此外,周細(xì)胞還具有調(diào)控毛細(xì)血管血流量、細(xì)胞碎屑清除和吞噬以及血腦屏障滲透性的作用,其多功能性是目前研究的熱點(diǎn)之一,所以對(duì)血管周細(xì)胞的生物學(xué)特征、標(biāo)記物、細(xì)胞功能等的研究都為相關(guān)研究提供基礎(chǔ)資料。周細(xì)胞產(chǎn)生手指狀的外延以調(diào)控毛細(xì)血管的血流量。周細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞之間共同擁有一個(gè)基膜,基膜上有多種細(xì)胞連接,包括多種整合素、神經(jīng)鈣黏素、纖連蛋白以及接合素。它還參與毛細(xì)血管直徑的雙向調(diào)控;毛細(xì)血管受損時(shí),周細(xì)胞還可增殖,分化為內(nèi)皮細(xì)胞和成纖維細(xì)胞。

          5.方法簡(jiǎn)介:

          實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠血管周細(xì)胞采用膠原酶-中性蛋白酶聯(lián)合消化法及不銹鋼網(wǎng)篩過濾法結(jié)合密度梯度離心法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

          6.質(zhì)量檢測(cè):

          實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠微血管周細(xì)胞經(jīng)alpha-SMA免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

          7.培養(yǎng)信息:

          包被條件PLL0.1mg/ml

          培養(yǎng)基含FBS、生長(zhǎng)添加劑、PenicillinStreptomycin

          產(chǎn)品貨號(hào)CM-R187

          換液頻率每2-3天換液一次

          生長(zhǎng)特性貼壁

          細(xì)胞形態(tài)成纖維細(xì)胞樣

          傳代特性可傳2-3

          消化液0.25%胰蛋白酶

          培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%CO25%

           

          實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:

          1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;

          2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;

          3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;

          4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;

          5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

          實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

          一、分離與培養(yǎng):

          1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;

          2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

          3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

          4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

          5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

          二、免疫熒光鑒定:

          1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

          2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

          3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

          4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

          5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

          6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

           MAGI1 / CNKSR3 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)

           MRPL44 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)

           VTI1A 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)

           B3GALT5 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)

           Citrate synthase / CS 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)

           IL17 / IL17A CHO細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)

           ROR1 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)

          大鼠 CD63 / Tspan-30 / Tetraspanin-30 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)

          大鼠 OLR1 / LOX1 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)

          CD40L / CD154 / TNFSF5 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)

          大鼠微血管周細(xì)胞外致密纖維尾部蛋白4抗體Anti-ACE Antibody小鼠趨化因子elisa檢測(cè)試劑盒品牌

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