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          產品中心

          當前位置:首頁產品中心科研細胞原代細胞小鼠表皮角化細胞
          小鼠表皮角化細胞

          產品簡介

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          (HAT+潮) (10毫升:10倍濃縮)

          產品廠地:上海市
          更新時間:2025-02-20
          廠商性質:經銷商
          訪問量:366
          詳細介紹在線留言
          品牌其他品牌貨號GOY-01X1193
          規格5×10?Cells/T25培養瓶供貨周期現貨
          主要用途產品僅供科研使用應用領域化工

          實驗要點及說明:

          1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;

          2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;

          3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

          4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;

          5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

          產品屬性:  

          產品名稱

          規格

          貨號

          小鼠表皮角化細胞

          5×10?Cells/T25培養瓶

          GOY-01X1193

          商品介紹:

          名稱    小鼠表皮角化細胞  

          2.組織來源:皮膚組織

          3.產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶

          4.細胞簡介:

          小鼠表皮角化細胞分離自皮膚組織;表皮位于動物皮膚的外層,由胚胎時期外胚層形成,具有抗摩擦和抗損傷的作用。表皮是皮膚的淺層結構,由復層扁平上皮構成。從基底層到表面可分為五層,即基底層、棘層、顆粒層、透明層和角質層。表皮角化細胞(KC)是構成表皮的主要細胞成分,在體內處于不斷增殖過程中,分裂的角化細胞主要位于其基底層,少數位于棘細胞層。隨著向表層的推移,細胞的分化程度逐漸增加,并喪失分裂活性。

          5.方法簡介:

          實驗室分離的小鼠表皮角化細胞先中性蛋白酶消化、后胰蛋白酶-膠原酶混合消化法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

          6.質量檢測:

          實驗室分離的小鼠表皮角化細胞PCNA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

          7.培養信息:

          包被條件鼠尾膠原2-5μg/cm2

          培養基含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

          產品貨號CM-M168

          換液頻率每2-3天換液一次

          生長特性貼壁

          細胞形態上皮細胞樣

          傳代特性可傳1-2

          消化液0.25%胰蛋白酶

          培養條件氣相:空氣,95%CO25%

          冷凍保存細胞之方法?

          冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

          冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

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          實驗報告:

          一、分離與培養:

          1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;

          2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

          3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

          4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

          5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

          二、免疫熒光鑒定:

          1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

          2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

          3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

          4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

          5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

          6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

           CA XII 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽

           CA II 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶Myc標簽

           CA II 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽

           TRAILR1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽

           PTP1B / PTPN1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽

           CA IX 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶Myc標簽

           CA IX 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽

          小鼠 IL10 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽

           ANXA2 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶HA標簽

           TMED10 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶HA標簽

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