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          PRODUCTS CENTER

          產(chǎn)品中心

          當(dāng)前位置:首頁產(chǎn)品中心科研細(xì)胞細(xì)胞系D283 Med (腦髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞)
          D283 Med (腦髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞)

          產(chǎn)品簡介

          D283 Med (腦髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞)的相關(guān)*:DNA損傷彗星中性檢測*試劑盒(銀染) 20次
          *處理DNA損傷彗星熒光檢測試劑盒 20次
          內(nèi)切核酸III處理DNA損傷彗星熒光檢測試劑盒 20次
          FGP處理DNA損傷彗星熒光檢測試劑盒 20次
          紫外線處理DNA損傷彗星熒光檢測試劑盒 20次
          細(xì)胞DNA損傷彗星熒光檢測試劑盒 20次

          產(chǎn)品廠地:上海市
          更新時間:2025-02-19
          廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
          訪問量:463
          詳細(xì)介紹在線留言
          品牌其他品牌貨號GOY-01X0269
          規(guī)格1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶供貨周期現(xiàn)貨
          主要用途產(chǎn)品僅供科研使用應(yīng)用領(lǐng)域化工

          實驗要點及說明:

          1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;

          2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;

          3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

          4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;

          5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

          產(chǎn)品屬性:  

          產(chǎn)品名稱

          規(guī)格

          貨號

          D283 Med (腦髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞)

          1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

          GOY-01X0269

          商品介紹:

          名稱    D283 Med (腦髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞)  

          別稱D283 MED; D283-MED; D-283 Med; D-283MED; D283MED; D283Med; D283-Med; D283; Med 283; H283

          種屬人類

          年齡(性別)男性,6

          組織來源小腦

          生長特性半貼壁半懸浮

          細(xì)胞形態(tài)上皮細(xì)胞樣

          背景描述D283 Med細(xì)胞是由Friedman等人于1985年建系,源自一名6歲患有神經(jīng)管細(xì)胞瘤有腹腔轉(zhuǎn)移的白人男性小孩的腹水細(xì)胞。

          生物安全等級1

          生長培養(yǎng)基MEM10% FBS1% P/S

          推薦傳代比例1:2-1:4

          推薦換液頻率2~3/

          倍增時間~ 52 小時

          凍存條件

          凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

          溫度:液氮

          培養(yǎng)條件

          氣相:空氣,95%CO?5%

          溫度:37℃

          致瘤性Yes, in nude mice(The cells form serially transplantable intercranial and subcutaneous tumors.) Yes, in soft agar

          基因表達(dá)情況The cells produce tumors in nude mice and the resulting tumors are glutamine synthetase positive; neuron specific enolase positive; glial fibrillary acidic proteins negative; S100 (S-100) protein negative; The cells express elevated levels of four biochemical markers of SCLC (neuron specific enolase; the brain isoenzyme of creatine kinase; L-DOPA decarboxylase; bombesin-like immunoreactivity)

          冷凍保存細(xì)胞之方法?

          冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

          冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

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          實驗報告:

          一、分離與培養(yǎng):

          1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;

          2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

          3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

          4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

          5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

          二、免疫熒光鑒定:

          1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

          2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

          3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

          4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

          5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

          6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

          大鼠甘油醛-3-脫氫(GAPDH)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

          猴子甲狀旁腺激素(PTH)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

          結(jié)核菌桿(TB)抗體(IgA)免疫試劑盒*直銷

          顆粒體蛋白(GRN)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

          八聚體轉(zhuǎn)錄因子(OTF2B)免疫試劑盒*直銷

          可溶性白介素7受體(sIL-7R)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

          醛固酮(ALD)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

          大鼠干擾素誘導(dǎo)蛋白11(IP-11/CXCL11)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

          清道夫受體類B成員1(SCARB1)免疫試劑盒*直銷

          兔前列腺素F(PG-F)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

          D283 Med (腦髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞)125mL MES Lysis Buffer with NP-40,2X   MES Lysis Buffer with NP-40,2X   常溫保存

          100次 轉(zhuǎn)ESPES-Nos 基因植物PCR Mix (36S-EPSES-Nos 基因) Plant DNA Barcoding PCR Mix -20℃保存

          2 ug pALEX a pALEX a 低溫運輸,-20℃保存

          YEP培養(yǎng)基 YEP Medium 250g

          25mL Chaps Lysis Buffer,2X  Chaps Lysis Buffer,2X  常溫保存

          β-溶血性鏈球菌  

          25g DEAE葡聚糖凝膠 A-25 DEAE-Sephadex A-25 -20℃保存

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