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          產品中心

          當前位置:首頁產品中心科研細胞原代細胞腦動脈血管平滑肌細胞
          腦動脈血管平滑肌細胞

          產品簡介

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          植物V型ATP(V type

          產品廠地:上海市
          更新時間:2025-02-19
          廠商性質:經銷商
          訪問量:353
          詳細介紹在線留言
          品牌其他品牌貨號GOY-01X1053
          規格5×10?Cells/T25培養瓶供貨周期現貨
          主要用途產品僅供科研使用應用領域化工

          冷凍保存細胞之方法?

          冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

          冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

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          產品屬性:   

          產品名稱

          規格

          貨號

          腦動脈血管平滑肌細胞

          5×10?Cells/T25培養瓶

          GOY-01X1053

          商品介紹:

          名稱    腦動脈血管平滑肌細胞   

          2.組織來源:腦動脈組織

          3.產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶

          4.細胞簡介:

          腦動脈血管平滑肌細胞分離自腦動脈組織;腦動脈有成對的頸內動脈和椎動脈互相銜接成動脈循環;靜脈系多不與同名動脈拌行,所收集的靜脈血先進入靜脈竇再匯入頸內靜脈;各級靜脈都沒有瓣膜。它包括腦的動脈系統和腦的靜脈系統。腦動脈平滑肌細胞原代分離培養3天后,可見細胞貼壁伸展,細胞形態大小不一,呈梭形、不規則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細胞匯合,多數細胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長,高低起伏;細胞密度低時,常交織成網狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態學特征和生長特點。

          5.方法簡介:

          實驗室分離的人腦動脈平滑肌細胞采用胰蛋白酶-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

          6.質量檢測:

          實驗室分離的人腦動脈血管平滑肌細胞α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

          7.培養信息:

          培養基含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

          產品貨號CM-H116

          換液頻率每2-3天換液一次

          生長特性貼壁

          細胞形態成纖維細胞樣

          傳代特性可傳5代左右;3代以內狀態最佳

          消化液0.25%胰蛋白酶

          培養條件氣相:空氣,95%CO25%

           

          實驗要點及說明:

          1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;

          2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;

          3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

          4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;

          5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

          實驗報告:

          一、分離與培養:

          1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;

          2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

          3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

          4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

          5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

          二、免疫熒光鑒定:

          1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

          2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

          3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

          4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

          5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

          6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

          WFDC2 基因全長ORF克隆

          IL12B 基因全長ORF克隆

          KITLG 基因全長ORF克隆

          IL8 基因全長ORF克隆

          CCL5 基因全長ORF克隆

          RBP4 基因全長ORF克隆

          IL33 基因全長ORF克隆

          CAR9 基因全長ORF克隆

          食蟹猴 BMP2 基因全長ORF克隆

          食蟹猴 EPHA4 基因全長ORF克隆

          腦動脈血管平滑肌細胞0.78-50 ng/mL 人ATP依賴RNA解旋DDX42(RNAHP)ELISA試劑盒

          0.312-20 ng/mL 腸道病毒EV71核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)

          0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human Lamina-associated polypeptide 2, isoform alpha

          L-半胱鹽酸鹽 英文名稱:L- Cysteine hydrochloride 產品規格:0.04g/支*5

          腸球菌瓊脂 英文名稱:Enterococcus Agar 產品規格:250g

          0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Kallikrein-6

          0.78-50 ng/mL 人信號傳導和轉錄激活因子5 B(STAT5B)ELISA試劑盒

          7.8-500 ng/mL 人E3泛素蛋白連接CBL-B(E3 ubiquitin-protein ligase CBL-B)ELISA試劑盒

          0.78-50 ng/mL 人蛋白hepsin(Serine protease hepsin)ELISA試劑盒

          1.56-100 ng/mL 人甲基多巴A亞基B(MEP1B)ELISA試劑盒

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