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          PRODUCTS CENTER

          產(chǎn)品中心

          當(dāng)前位置:首頁(yè)產(chǎn)品中心科研細(xì)胞細(xì)胞系ECV-304 (臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞) (T24污染細(xì)胞系)
          ECV-304 (臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞) (T24污染細(xì)胞系)

          產(chǎn)品簡(jiǎn)介

          ECV-304 (臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞) (T24污染細(xì)胞系)的相關(guān)*:植物培養(yǎng)細(xì)胞DNA損傷彗星*熒光檢測(cè)試劑盒 20次
          細(xì)DNA損傷彗星熒光檢測(cè)試劑盒 20次
          細(xì)DNA損傷彗星*熒光檢測(cè)試劑盒 20次
          酵母DNA損傷彗星熒光檢測(cè)試劑盒 20次
          酵母DNA損傷彗星*熒光檢測(cè)試劑盒 20次
          果蠅DNA損傷彗星熒光檢測(cè)試劑盒 20次

          產(chǎn)品廠(chǎng)地:上海市
          更新時(shí)間:2025-02-18
          廠(chǎng)商性質(zhì):經(jīng)銷(xiāo)商
          訪(fǎng)問(wèn)量:562
          詳細(xì)介紹在線(xiàn)留言
          品牌其他品牌貨號(hào)GOY-01X0271
          規(guī)格1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶供貨周期現(xiàn)貨
          主要用途產(chǎn)品僅供科研使用應(yīng)用領(lǐng)域化工

          冷凍保存細(xì)胞之方法?

          冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。

          冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí), 以防止冰晶過(guò)大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

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          產(chǎn)品屬性:   

          產(chǎn)品名稱(chēng)

          規(guī)格

          貨號(hào)

          ECV-304 (臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞) (T24污染細(xì)胞系)

          1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

          GOY-01X0271

          商品介紹:

          名稱(chēng)    ECV-304 (臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞) (T24污染細(xì)胞系)   

          別稱(chēng)ECV 304; ECV304; ECV; E304; T24(ECV304)

          年齡(性別)82

          組織來(lái)源膀胱

          生長(zhǎng)特性貼壁細(xì)胞

          細(xì)胞形態(tài)上皮細(xì)胞樣

          背景描述ECV-304細(xì)胞本身為人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞,可用于臍靜脈內(nèi)皮損傷修復(fù)的研究,但是經(jīng)檢測(cè)證明,ECV-304細(xì)胞已經(jīng)被膀胱癌細(xì)胞污染;ECV-304細(xì)胞具有T24細(xì)胞特性。

          生長(zhǎng)培養(yǎng)基MEM10% FBS1% P/S

          推薦傳代比例1:2-1:4

          推薦換液頻率2~3/

          倍增時(shí)間~48 hours

          凍存條件

          凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

          溫度:液氮

          培養(yǎng)條件

          氣相:空氣,95%CO25%

          溫度:37℃

           

          實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明:

          1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;

          2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理;

          3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;

          4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過(guò)大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;

          5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴(lài)氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

          實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

          一、分離與培養(yǎng):

          1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;

          2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

          3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

          4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

          5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

          二、免疫熒光鑒定:

          1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

          2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

          3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

          4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;

          5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

          6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

          馬腫瘤壞死因子α(TNF-α)免疫試劑盒*直銷(xiāo)

          大鼠脯羥化(PHD)免疫試劑盒*直銷(xiāo)

          牛纖連蛋白(FN)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

          豬雙氫睪酮(DHT)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

          小鼠戊型肝炎病毒(HEV)抗體(IgG)免疫試劑盒*直銷(xiāo)

          食蟹猴胰高血糖素(GC)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

          抗斑疹傷寒抗體(anti-typhus-Ab)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

          Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)免疫試劑盒*直銷(xiāo)

          大鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白D(SP-D)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

          大鼠2,3-二甘油酸(2,3-DPG)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

          ECV-304 (臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞) (T24污染細(xì)胞系)1臺(tái) 剪切式勻漿機(jī)  常溫

          120次  酸性檢測(cè)試劑盒 Oxidative Stress Detection Kit 常溫保存

          100mL MES Buffer,0.5M,pH7.4  MES Buffer,0.5M,pH7.4  常溫保存

          100次 無(wú)脊椎動(dòng)物種屬鑒定PCR Mix(線(xiàn)粒體CO1基因) Animal DNA Barcoding PCR Mix -20℃保存

          2 ug pMA-27s-1 pMA-27s-1 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

          果蠅培養(yǎng)基 Drosophila medium 250g

          1瓶 SPC-A-1細(xì)胞株 SPC-A-1 低溫運(yùn)輸和保存

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