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          產品中心

          當前位置:首頁產品中心科研細胞原代細胞氣管上皮細胞
          氣管上皮細胞

          產品簡介

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          免疫化學緩沖溶液試劑專題
          10倍平衡鹽(PBS)緩沖溶液 500毫升

          產品廠地:上海市
          更新時間:2025-02-18
          廠商性質:經銷商
          訪問量:479
          詳細介紹在線留言
          品牌其他品牌貨號GOY-01X0715
          規格5×10?Cells/T25培養瓶供貨周期現貨
          主要用途產品僅供科研使用應用領域化工

          實驗要點及說明:

          1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;

          2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;

          3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

          4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;

          5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

          產品屬性:  

          產品名稱

          規格

          貨號

          氣管上皮細胞

          5×10?Cells/T25培養瓶

          GOY-01X0715

          商品介紹:

          名稱    氣管上皮細胞  

          2.組織來源:氣管

          3.產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶

          4.細胞簡介:

          氣管上皮細胞分離自氣管組織;氣管(Trachea),呼吸器官的一部分;為后壁略平的圓筒型管狀。上端平第六頸椎下緣,與環狀軟骨相連;向下至第四、五胸椎體(相當胸骨角平面)交界處,分左、右主支氣管,分叉處稱為氣管杈。氣管主要由14-16個半環狀軟骨構成,有彈性,軟骨為“C"字形的軟骨環,缺口向后,各軟骨環以韌帶連接起來,環后方缺口處由平滑肌和致密結締組織連接,保持了持續張開狀態。管腔襯以粘膜,表面覆蓋纖毛上皮,粘膜分泌的粘液可粘附吸入空氣中的灰塵顆粒,纖毛不斷向咽部擺動將粘液與灰塵排出,以凈化吸入的氣體。氣管上皮是氣道與外界環境接觸的第一道防線,不僅是各種病原體、炎癥介質作用的靶細胞,還作為效應細胞合成、釋放多種炎性介質和細胞因子從而參與氣道炎癥及免疫反應。體外培養的原代氣管上皮細胞因與體內組織在形態結構和功能活動上存在很大的相似性,因此,在基礎及臨床研究中極為重要。

          5.方法簡介:

          實驗室分離的人氣管上皮細胞采用鏈霉蛋白酶-中性蛋白酶混合消化法結合差速貼壁法,并通過上皮細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

          6.質量檢測:

          實驗室分離的人氣管上皮細胞PCK免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

          7.培養信息:

          包被條件鼠尾膠原2-5μg/cm2

          培養基含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

          產品貨號CM-H008

          換液頻率每2-3天換液一次

          生長特性貼壁

          細胞形態上皮細胞樣

          傳代特性可傳2-3

          消化液0.25%胰蛋白酶

          培養條件氣相:空氣,95%CO25%

          冷凍保存細胞之方法?

          冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

          冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

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          實驗報告:

          一、分離與培養:

          1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;

          2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

          3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

          4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

          5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

          二、免疫熒光鑒定:

          1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

          2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

          3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

          4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

          5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

          6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

           AKT1 基因全長ORF克隆

           EphB2 基因全長ORF克隆

           MICB 基因全長ORF克隆

           SEMA3A 基因全長ORF克隆

           DAPK3 基因全長ORF克隆

           sFRP-2 基因全長ORF克隆

           HTR4 基因全長ORF克隆

           CD36 / SCARB3 基因全長ORF克隆

           XBP1 基因全長ORF克隆

           MMP-14 基因全長ORF克隆

          氣管上皮細胞連四硫酸鹽培養基 英文名稱:Tetrathionate Medium 產品規格:250g

          90ml 緩沖蛋白胨水(BPW)均質袋 英文名稱:Buffered Peptone Water 產品規格:90ml/袋*10

          white培養基 英文名稱:White Medium 產品規格:250g

          菌種和底層瓊脂培養基 英文名稱:Medium I(foe Seed and Basal Layer) 產品規格:250g

          0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human Adenosine deaminase domain-containing protein 1

          -雙岐桿菌鑒定 英文名稱: 產品規格:20支

          15.6-1000 pg/mL 人血小板源生長因子D(PDGF-D)ELISA試劑盒

          弗拉特氏菌培養基 英文名稱: 產品規格:250g

          可溶性淀粉培養基 英文名稱:Soluble Starch Medium 產品規格:250g

          0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Calcineurin subunit B type 1

           


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