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          PRODUCTS CENTER

          產(chǎn)品中心

          當(dāng)前位置:首頁(yè)產(chǎn)品中心科研細(xì)胞原代細(xì)胞小鼠結(jié)腸平滑肌細(xì)胞
          小鼠結(jié)腸平滑肌細(xì)胞

          產(chǎn)品簡(jiǎn)介

          小鼠結(jié)腸平滑肌細(xì)胞的相關(guān)*:組織結(jié)構(gòu)型神經(jīng)元一氧化氮合成(cNOS/NOS1/nNOS)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒 20次
          血液結(jié)構(gòu)型神經(jīng)元一氧化氮合成(cNOS/NOS1/nNOS)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒 20次
          體液結(jié)構(gòu)型神經(jīng)元一氧化氮合成(cNOS/NOS1/nNOS)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒 20次
          細(xì)胞誘導(dǎo)型巨噬細(xì)胞一氧化氮合成(iNOS /NOS2/mNOS)活性比色法定量

          產(chǎn)品廠地:上海市
          更新時(shí)間:2025-02-17
          廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
          訪問量:457
          詳細(xì)介紹在線留言
          品牌其他品牌貨號(hào)GOY-01X0857
          規(guī)格5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶供貨周期現(xiàn)貨
          主要用途產(chǎn)品僅供科研使用應(yīng)用領(lǐng)域化工

          實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:

          1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;

          2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;

          3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;

          4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;

          5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

          產(chǎn)品屬性:  

          產(chǎn)品名稱

          規(guī)格

          貨號(hào)

          小鼠結(jié)腸平滑肌細(xì)胞

          5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

          GOY-01X0857

          商品介紹:

          名稱    小鼠結(jié)腸平滑肌細(xì)胞  

          2.組織來源:結(jié)腸組織

          3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

          4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

          小鼠結(jié)腸平滑肌細(xì)胞分離自結(jié)腸組織;結(jié)腸在右髂窩內(nèi)續(xù)于盲腸,在第3骶椎平面連接直腸。結(jié)腸分升結(jié)腸、橫結(jié)腸、降結(jié)腸和乙狀結(jié)腸4部分,大部分固定于腹后壁,結(jié)腸的排列酷似英文字母“M",將小腸包圍在內(nèi)。結(jié)腸橫切面由內(nèi)到外依次為:黏膜(上皮層、固有層、黏膜肌層),黏膜下層(疏松結(jié)締組織),肌層(內(nèi)環(huán)形、外縱行兩層平滑肌),外膜(纖維膜或漿膜)。結(jié)腸平滑肌細(xì)胞主要分布于黏膜肌層和肌層的內(nèi)環(huán)形、外縱行平滑肌;結(jié)腸運(yùn)動(dòng)少而緩慢,對(duì)刺激的反應(yīng)也較遲緩。結(jié)腸平滑肌在食物消化與吸收、腸道運(yùn)動(dòng)和物質(zhì)分泌、誘發(fā)全身炎癥反應(yīng)以及細(xì)胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑等研究中起著重要的作用。結(jié)腸平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見細(xì)胞貼壁伸展,細(xì)胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細(xì)胞匯合,多數(shù)細(xì)胞伸展呈長(zhǎng)梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長(zhǎng),高低起伏;細(xì)胞密度低時(shí),常交織成網(wǎng)狀;密度高時(shí),則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長(zhǎng)較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長(zhǎng)特點(diǎn)。結(jié)腸平滑肌運(yùn)動(dòng)活性受到神經(jīng)遞質(zhì)、胃腸激素和藥物等因素的調(diào)節(jié)。隨著現(xiàn)代胃腸動(dòng)力學(xué)研究的進(jìn)展,對(duì)胃腸運(yùn)動(dòng)的研究已從器官、組織水平發(fā)展到細(xì)胞、分子水平,要求在胃腸道單個(gè)平滑肌細(xì)胞標(biāo)本上來完成各種電生理、藥理和分子生物學(xué)等實(shí)驗(yàn)。體外培養(yǎng)細(xì)胞,由于影響因素單一,是研究細(xì)胞功能以及相應(yīng)的細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制的基礎(chǔ)。

          5.方法簡(jiǎn)介:

          實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠結(jié)腸平滑肌細(xì)胞采用胰蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

          6.質(zhì)量檢測(cè):

          實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠結(jié)腸平滑肌細(xì)胞經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

          7.培養(yǎng)信息:

          培養(yǎng)基含FBS、生長(zhǎng)添加劑、PenicillinStreptomycin

          產(chǎn)品貨號(hào)CM-M044

          換液頻率每2-3天換液一次

          生長(zhǎng)特性貼壁

          細(xì)胞形態(tài)成纖維細(xì)胞樣

          傳代特性可傳3代左右

          消化液0.25%胰蛋白酶

          培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%CO25%

          冷凍保存細(xì)胞之方法?

          冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。

          冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí), 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

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          實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

          一、分離與培養(yǎng):

          1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;

          2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

          3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

          4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

          5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

          二、免疫熒光鑒定:

          1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

          2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

          3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

          4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

          5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

          6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

          小鼠 CD37 基因全長(zhǎng)ORF克隆

          小鼠 CD26 / DPP4 基因全長(zhǎng)ORF克隆

          小鼠 CD24A 基因全長(zhǎng)ORF克隆

          小鼠 MSI2 基因全長(zhǎng)ORF克隆

          小鼠 WFDC2 基因全長(zhǎng)ORF克隆

          小鼠 ERBB2 基因全長(zhǎng)ORF克隆

          小鼠 PTPRC 基因全長(zhǎng)ORF克隆

          小鼠 CD33 基因全長(zhǎng)ORF克隆

          小鼠 CD6 轉(zhuǎn)錄變體2 基因全長(zhǎng)ORF克隆

          小鼠 PTK6 基因全長(zhǎng)ORF克隆

          小鼠結(jié)腸平滑肌細(xì)胞0.156-10 ng/mL 人SAAL1蛋白(Protein SAAL1)ELISA試劑盒

          15.6-1000 pg/mL 人白介素18(IL-18)ELISA試劑盒

          0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human NAD-dependent deacetylase sirtuin-2

          0.312-20 ng/mL 人轉(zhuǎn)錄因子E2-alpha ELISA試劑盒

          0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Flotillin-1

          0.78-50 uIU/mL ELISA Kit for Tetrahydrobiopterin

          10%氯化鈉胰酪胨大豆肉湯 英文名稱:10% NaCl Trypticase Soy Broth 產(chǎn)品規(guī)格:9ml*20支/包

          0.156-10 ng/mL 人白細(xì)胞免疫球蛋白樣受體亞家族B成員4(LILRB4)ELISA試劑盒

          0.312-20 ng/mL 人Humanin樣蛋白6(HN6)ELISA試劑盒

          31.2-2000 pg/mL 人巖藻糖基轉(zhuǎn)移6(FUT6)ELISA試劑盒

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