021-39921927
產品簡介
bEnd.3 [BEND3] (小鼠腦微血管內皮細胞)的相關*：限制性片段長度多態性（RFLP）基因分析試劑專題 通用型RFLP基因分析試劑盒 20次引物設計合成和切位點分析 1個基因人體（apolipoprotein）RFLP基因分析試劑盒 20次人體EIF-2AK3 RFLP基因分析試劑盒 20次人體BRCA－2 RFLP基因分析試劑盒 20次
| 品牌 | 其他品牌 | 貨號 | GOY-01X0584 |
|---|---|---|---|
| 規格 | 1×10?cells/T25培養瓶 | 供貨周期 | 現貨 |
| 主要用途 | 產品僅供科研使用 | 應用領域 | 化工 |
使用方法：
收到細胞后，請按照以下方法進行操作。 1. 取出25cm2培養瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細胞培養箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩定細胞狀態。 2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養。 3. 細胞傳代 1) 吸出25cm2培養瓶中的培養基，用PBS清洗細胞一次； 2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入*培養液終止消化； 3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的*培養基至5mL，放入37℃，5% CO2細胞培養箱中培養； 4) 待細胞*貼壁后，培養觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養基。 |
公司細胞現貨供應，質量有保證、*、實驗效果好，我司為您提供免費代測服務，同時提供最新價格、說明書、規格、用途、實驗原理等相關操作說明。
產品名稱 | bEnd.3 [BEND3] (小鼠腦微血管內皮細胞) |
規格 | 1×10?cells/T25培養瓶 |
貨號 | GOY-01X0584 |
產品介紹：
名稱 bEnd.3 [BEND3] (小鼠腦微血管內皮細胞) 別稱bEND.3; b.End3; Bend.3; bEnd3; brain-derived Endothelial cells.3 種屬小鼠 年齡（性別）6周齡 組織來源大腦皮層 生長特性貼壁細胞 細胞形態上皮細胞樣 背景描述The cells were transformed by infection with the NTKmT retrovirus vector that expresses polyomavirus middle T antigen 生物安全等級1 生長培養基DMEM＋10% FBS＋1% P/S 推薦傳代比例1:4-1:6 推薦換液頻率2~3次/周 倍增時間~24-32小時 凍存條件 凍存液：55% 基礎培養基+40%FBS+5%DMSO 溫度：液氮 培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5% 溫度：37℃ 抗原表達情況ICAM-1 +; VCAM-1 +; MAdCAM-1 + 基因表達情況von Willebrand factor,ICAM-1 +; VCAM-1 +; MAdCAM-1 +,The endothelial nature of these cells was confirmed by the observed expression of von Willebrand factor and uptake of fluorescently labeled low density lipoprotein (LDL).,The expression of Peyer's Patch high endothelial receptor for lymphocytes, the mucosal vascular addressin (MAdCAM-1) and E-selectin can be induced on bEnd |
細胞特點及處理：
產品特點: 1、 使用方便:不需昂貴設備。 2、 可以處理各種細菌菌體，包括新鮮菌液和冰凍菌體。 3、 將蛋白提取的時間縮短至30分鐘-1小時。 4、 采用溫和的中性裂解組分，保持蛋白活性。 5、 含蛋白穩定劑，提取的蛋白穩定。 6、 紫外檢測蛋白濃度時，背景干擾低。 7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制劑配方優化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨立的蛋白酶抑制劑；每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性，包括絲氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。 8、 本試劑盒中不有EDTA，與金屬螯和層析等兼容。 | 細胞處理： 1） 復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。 2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。 對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法： 1.棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。 2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。 3.按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。 4.將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 |
細胞培養技巧：
一、凍存時的注意事項： 1. 在冷凍保存之前，應觀察細胞生長是否良好(log phase) 且存活率高，凍存的細胞密度為80 – 90 ％最佳 2. 冷凍前檢測細胞是否保有其*性質，例如是否有雜細胞或者支原體等。 3. 使用的DMSO 應為試劑級等級，以5~10 ml 小體積分裝，4 度避光保存，勿作多次解凍。使用的甘油也應為試劑級等級，以高壓蒸汽 滅菌后避光保存。在開啟后一年內使用，因長期儲存后對細胞會有毒性。 4. 冷凍保存的細胞濃度： 4-1. 正常的成纖維細胞: 1-3x 10^6 cells/ml 4-2 雜交瘤細胞: 1~3 x 10^6 cells/ml，細胞濃度不要太高，某些雜交瘤會因冷凍濃度太高而在解凍24 小時后。 4-3.貼壁腫瘤細胞: 1 x 10^6，依細胞種類而異。腺癌類的細胞解凍后須較高之濃度，而HeLa 只需1-3 x 10^6 cells/ml。 4-4. 懸浮細胞: 5~10 x 10^6 cells/ml, 而淋巴類細胞須至少5 x 10^6 cells/ml。 5. 冷凍保護劑濃度為5 %或10 ％ DMSO，若是不確定細胞之冷凍條件，在做冷凍保存之同時，亦應作一個backup culture，以防止冷凍失敗。
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