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          PRODUCTS CENTER

          產(chǎn)品中心

          當前位置:首頁產(chǎn)品中心科研細胞原代細胞大鼠臍靜脈內皮細胞
          大鼠臍靜脈內皮細胞

          產(chǎn)品簡介

          大鼠臍靜脈內皮細胞的相關*:小鼠血管內皮細胞生長因子(VEGF)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應
          小鼠血管緊張素轉化2(ACE2)免疫試劑盒*直銷
          小鼠血管緊張素轉化(ACE)免疫試劑盒進口、組裝
          小鼠血管緊張素原(aGT)免疫試劑盒進口、分裝
          小鼠血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應

          產(chǎn)品廠地:上海市
          更新時間:2025-02-16
          廠商性質:經(jīng)銷商
          訪問量:345
          詳細介紹在線留言
          品牌其他品牌貨號GOY-01X1353
          規(guī)格5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶供貨周期現(xiàn)貨
          主要用途產(chǎn)品僅供科研使用應用領域化工

          冷凍保存細胞之方法?

          冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

          冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

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          產(chǎn)品屬性:   

          產(chǎn)品名稱

          規(guī)格

          貨號

          大鼠臍靜脈內皮細胞

          5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

          GOY-01X1353

          商品介紹:

          名稱    大鼠臍靜脈內皮細胞   

          2.組織來源:臍帶組織

          3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

          4.細胞簡介:

          大鼠臍靜脈內皮細胞分離自臍帶組織;它是臍靜脈的重要結構組成細胞之一,在機體的正常生理過程中發(fā)揮著重要作用。臍帶是哺乳類的連接胎兒和胎盤的管狀結構,臍帶中通過尿膜的血管即臍動脈和臍靜脈,卵黃囊的血管即臍腸系膜動脈及臍腸系膜靜脈。在子宮中,子宮動脈在胎盤的母體部分出的毛細血管,與胎盤的子體部胎兒毛細血管靠近,在此處母體和胎兒的血液間進行CO2O2,代謝產(chǎn)物即代謝廢物和營養(yǎng)物質的交換。臍動脈將胎兒產(chǎn)生的廢物運送至胎盤,臍靜脈將O2和營養(yǎng)物質從胎盤運送給胎兒。

          5.方法簡介:

          實驗室分離的大鼠下腔靜脈內皮細胞采用胰蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法結合差速貼壁法、并通過內皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

          6.質量檢測:

          實驗室分離的大鼠臍靜脈內皮細胞經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

          7.培養(yǎng)信息:

          包被條件PLL0.1mg/ml),明膠(0.1%

          培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

          產(chǎn)品貨號CM-R232

          換液頻率每2-3天換液一次

          生長特性貼壁

          細胞形態(tài)內皮細胞樣

          傳代特性可傳3代左右

          消化液0.25%胰蛋白酶

          培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%CO25%

           

          實驗要點及說明:

          1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;

          2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;

          3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

          4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;

          5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

          實驗報告:

          一、分離與培養(yǎng):

          1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;

          2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

          3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

          4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

          5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

          二、免疫熒光鑒定:

          1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

          2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

          3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

          4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

          5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

          6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

           CNPY2 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

           CALR / Calreticulin 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

           CALR / Calreticulin 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

           CALU / Calumenin 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

           ROBO2 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

          食蟹猴 IFNA4 / IFNα4 / Interferon alpha-4 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

          食蟹猴 IL1R2 / IL1RB 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

          食蟹猴 EDAR 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

          食蟹猴 LTBR / TNFRSF3 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

          食蟹猴 IGFBP3 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

          大鼠臍靜脈內皮細胞Bacillus thuringiensisBMP結合內皮調節(jié)因子檢測試劑盒

          Bacillus thuringiensis磷脂C檢測試劑盒

          Bacillus thuringiensisCC趨化因子配體24檢測試劑盒

          Bacillus thuringiensis雙皮質檢測試劑盒

          Bacillus thuringiensis核糖核酸H檢測試劑盒

          Bacillus thuringiensis早期生長反應蛋白2檢測試劑盒

          Bacillus thuringiensis甲基胞嘧雙加氧3檢測試劑盒

          Bacillus thuringiensis甲基胞嘧雙加氧1檢測試劑盒

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